WWW.KN.LIB-I.RU
БЕСПЛАТНАЯ  ИНТЕРНЕТ  БИБЛИОТЕКА - Различные ресурсы
 

Pages:     | 1 || 3 |

«X МЕЖДУНАРОДНЫЙ СИМПОЗИУМ БИОЛОГИЧЕСКИЕ МЕХАНИЗМЫ СТАРЕНИЯ ТЕЗИСЫ 16 – 19 мая 2012 года Харьков УДК 591.1.15.871.74 Биологические механизмы старения X международный ...»

-- [ Страница 2 ] --

Известно, что с возрастом у всех млекопитающих происходит необратимая атрофия тимуса. При этом прогрессивно снижаются синтез и секреция полипептидных гормонов тимуса таких как тимозин, тимопоэтин и тимулин. Показано, что некоторые иммуномодуляторы, в частности, те же пептидные препараты тимуса, могут восстанавливать компетентность иммунных клеток в стареющем организме и увеличивать продолжительность жизни. Так же считается установленным, что снижение эндокринной активности тимуса играет ключевую роль в возрастных дисфункциях иммунной системы, поскольку заместительная терапия введением гормонов способна частично восстановить различные иммунные функции в старости. Связь столь широкого круга связанных с возрастом патологических процессов с дефектами иммунной системы привела к появлению предположения, что старение иммунной системы может ограничивать продолжительность жизни. Для проверки некоторых из выше следующих положений авторами был разработан способ, позволяющий значительно замедлять необратимую возрастную атрофию тимуса у крыс. Для этого тимус от молодых животных пересаживали в иммунопривилегированные зоны организма – переднюю камеру глаза или в тестикул стареющих крыс. По результатам длительного эксперимента удалось показать, что применение разработанного авторами способа привело к увеличению на (19±5) % средней и до 21 % максимальной продолжительности жизни животных.

Работа выполнена при финансовой поддержке программы президиума РАН «Поддержка инноваций и разработок», 2007, 2009, 2011; гранта Президента РФ для государственной поддержки молодых российских ученых МК -1245.2011.7.

ВПЛИВ ГОСТРОЇ ГІПОКСИЧНОЇ ГІПОКСІЇ НА ЗМІНИ СИСТЕМИ ОКСИДУ

АЗОТУ ТА ЕКСПРЕСІЮ ГЕНІВ ЕNOS ТА INOS У ЩУРІВ

РІЗНОГО ВІКУ Кульчицький О.К., Новікова С.М., Потапенко Р.І., Бурчинська М.К., Васильєв Р.Г.

ДУ «Інститут геронтології імені акад. Д.Ф.Чеботарьова НАМН України»

biochem@geront.kiev.ua Встановлено, що за старіння зменшується генерація оксиду азоту, про що свідчить зниження вмісту його стабільних метаболітів (NO2/NO3) у плазмі крові, міокарді і тканинах аорти старих щурів порівняно з дорослими. Рівень NO3 суттєво зростає у плазмі крові щурів обох вікових груп, проте у старих залишається більш низьким (майже у 2 рази).

Зміни інших показників системи NO мають різнонаправлену спрямованість, що залежить від досліджуваних тканин і віку. В аорті і міокарді дослідних дорослих щурів порівняно з контрольними вміст NO2/NO3 не змінюється, активність eNOS і iNOS зростає. У старих щурів, підданих гіпоксії, вміст NO2/NO3 в аорті дещо збільшується за незмінної активності eNOS і невеликого зростання iNOS, у міокарді, навпаки, рівень NO2/NO3 зростає за падіння eNOS-активності і стабільної активності іNOS. Існує значна різниця між рівнями експресії iNOS у цих умовах між дорослими і старими тваринами, а також у різних ділянках міокарду.

Дослідження експресії генів NO-синтазної активності показало, що існує значна різниця між рівнями експресії iNOS за умов гіпоксії між дорослими і старими тваринами, а також у різних ділянках міокарду. Так, у дорослих тварин експресія індуцибельної NO-синтази в правому і лівому шлуночках серця значно розрізнялася. Вихідний рівень такої експресії в правому шлуночку був у середньому на 108 % вищим, ніж у лівому. Під впливом гіпоксії рівень експресії значно змінювався, особливо через 24 години після закінчення експерименту.

Наведені результати свідчать про різні механізми зростання рівня стабільних метаболітів NO у крові дорослих і старих щурів за впливу гострої гіпоксії. У дорослих щурів воно відбувається за рахунок активації обох NO-синтаз (синтез NO de novo), у старих – шляхом активації іNOS і „спустошення” фізіологічних депо та, можливо, відтворення NO у нітрит-редуктазних реакціях.





ОЦЕНКА СОХРАНЕНИЯ УСТОЙЧИВОСТИ К ВЫСОКИМ КОНЦЕНТРАЦИЯМ

ИОНОВ МЕДИ ПОСЛЕ ПРЕДВАРИТЕЛЬНОЙ АДАПТАЦИИ МАЛЫМИ ДОЗАМИ

Кургузова Н.И., Длубовская В.Л.

НИИ биологии Харьковского национального университета имени В.Н. Каразина пл. Свободы, 4, 61022 Харьков, Украина Предварительные последовательные троекратные введения молодым и старым животным раствора сернокислой меди в дозе 0,23 мг на 1 г печени сопровождались формированием устойчивости к действию летальной дозы сернокислой меди (0,57 мг на 1 г печени).

Целью данной работы являлась оценка сохранения полученной устойчивости молодых и старых животных к действию высокой концентрации сернокислой меди после введения животным малых (адаптационных) доз по прошествии времени.

Экспериментальные животные обоих возрастов были разбиты на 4 группы: 4-я группа – молодые и старые животные, которые получили адаптационные дозы сернокислой меди по ранее разработанной схеме за 45 дней до введения им летальной дозы сернокислой меди. 3-я группа – животные обоих возрастов получившие малые дозы за 30 дней до введения высокой концентрации меди. 2-я группа – молодые и старые животные, получившие медь по схеме за 15 дней до введения летальной дозы и 1-я группа – животные, которым ввели летальную дозу меди через 1 сутки после троекратного введения малых доз сернокислой меди.

Контролем выступали животные, не получившие предварительно адаптационных доз сернокислой меди.

Контрольные животные, как молодые, так и старые, погибали в течение двух - шести часов после введения высокой дозы сернокислой меди (0,57 мг на 1 г печени).

Выживаемость оценивали спустя сутки после введения летальной дозы и через две недели. Для молодых животных 4-й группы выживаемость спустя сутки составила 20 %, животных 2-й группы – 88 %, 3-й – 57 % и 4-й – 100 %. Спустя две недели выживаемость составила 10 %, 50 %, 14 % и 80 % соответственно.

Старые животные спустя сутки все были живы, вне зависимости от давности адаптации. Однако после двух недель выживаемость старых животных 4-й группы была 50 %, 3-й – 80 %, 2-й – 70 % и 1-й – 80 %.

Как для молодых, так и для старых животных устойчивость к высоким концентрациям ионов меди имела нелинейную временную зависимость с пиком приходящимся на первые и 30-е сутки.

РОЛЬ ЦИТОТОКСИЧЕСКИХ ФАКТОРОВ И ИХ БИОИНДИКАЦИЯ У ПАЦИЕНТОВ

С ОБРАТИМЫМИ И НЕОБРАТИМЫМИ ПАТОЛОГИЧЕСКИМИ СОСТОЯНИЯМИ

Лавинская Е. В., Климова Е. М.

ГУ «Институт общей и неотложной хирургии НАМН Украины», г. Харьков, Украина lavinskaya_5@mail.ru Тяжесть течения различных патологических состояний может зависеть как от возраста пациентов, так и от временного промежутка – давности заболевания с начала его развития.

Существует классификация, определяющая стадии заболевания как переходные, обратимые и необратимые состояния. Актуальным является оценка изменения комплекса цитотоксических факторов в сыворотке крови пациентов с обратимыми и необратимыми состояниями с учетом давности их развития и формирования состояния предзаболевания и развития необратимых патологических реакций. Особый интерес в этой связи представляет использование различных скрининг-тестов для интегральной оценки всей совокупности патофизиологических факторов, характеризующих тяжесть состояния.

Цель работы – оценка изменения цитотоксичности сыворотки крови пациентов с обратимыми и необратимыми состояниями различных сроков давности с применением клеточной тест-системы Dunaliella viridis.

Для исследования цитотоксичности сыворотки крови использовали клеточный биоиндикатор D. viridis, разработанный в НИИ биологии Харьковского национального университета имени В. Н. Каразина и ГУ «Институт общей и неотложной хирургии НАМН Украины». Действие биоиндикатора основано на анализе изменений клеток одноклеточной водоросли после влияния различных патологических факторов, в данном случае сывороток крови больных, содержащих различные токсические компоненты. Производили учет морфофункциональных изменений клеток D. viridis и рассчитывали интегральный индекс цитотоксичности Іц, представляющий собой соотношение спонтанных морфофункциональных изменений к индуцированным морфофункциональным изменениям клеток D. viridis.

Были выявлены различные соотношения характера измененных клеток D. viridis в зависимости от возраста пациентов и давности развития патологических состояний.

Оказалось, что индекс цитотоксичности Іц сыворотки крови пациентов с миастенией, протекающий на фоне злокачественного поражения тимуса – тимомы (старшая возрастная группа) в 1,2 раза меньше, чем в сыворотке крови пациентов с генерализованной аутоиммунной миастенией (у молодых пациентов). Подобная закономерность выявлена во второй группе больных с нозологическими формами, не исключающими аутоиммунный компонент («панкреатит» и «панкреонекроз»): в сыворотке крови пациентов с панкреонекрозом индекс цитотоксичности (Іц) в 1,4 раза был меньше по сравнению с сывороткой крови пациентов с панкреатитом. Также полученные данные позволили построить в системе координат локальные геометрические зоны по наличию неподвижных клеток, наличию микро- и макроагрегатов. Индивидуальные показатели цитотоксичности, характеризующие миастению на фоне тимомы у пожилых пациентов с панкреонекрозом, располагаются ближе к началу координат, к области низкого индекса. Т. е. можно предположить, что необратимые состояния – наличие тимомы и панкреонекроза развиваются на фоне либо иммунологической толерантности, либо на фоне развития полной иммунологической анергии, при которой уже не происходит адекватного синтеза сигнальных, а при увеличении их концентрации – потенциально цитотоксических факторов, обладающих мембранотропным действием на клетки тест-системы. Как правило, необратимые патологические состояния ассоциированы с преклонным возрастом.

Таким образом, при обратимых и необратимых состояниях, развивающихся в различные сроки после дебюта развития заболевания, наблюдается различие в образовании и накоплении деструктивных цитотоксических факторов, оказывающих влияние на морфофункциональные особенности клеточного биоиндикатора, что сказывается на изменении интегрального индекса цитотоксичности.

ИССЛЕДОВАНИЕ МЕХАНИЗМОВ ГЕРОПРОМОТОРНОГО ДЕЙСТВИЯ ХЛОРИДА

КАДМИЯ НА ПРИМЕРЕ DROSOPHILA MELANOGASTER

Леонова И.С., Козлова Е.В., Падалко В.И.

НИИ биологии Харьковского национального университета имени В. Н. Каразина, пл. Свободы 4, 61022 Харьков, Украина irina_leonova200@mail.ru Высокий уровень загрязнения окружающей среды тяжелыми металлами является характерной чертой современной цивилизации. На сегодняшний день прямой связи между уровнем накопления металлов в организме и степенью развития возрастзависимых заболеваний не установлено. При этом возраст организма считается важным фактором при оценке токсичности металлов, а также признается, что сами металлы могут играть определенную роль в интенсификации процессов старения. Однако механизмы этого социально значимого явления остаются в значительной степени не изученными.

В настоящей работе исследовано влияние одного из распространенных загрязнителей окружающей среды – кадмия (в форме хлорида кадмия) на состояние метаболических процессов и продолжительность жизни Drosophila melanogaster.

Установлено, что в гомогенатах “молодых” (в возрасте 3 – 5 суток) насекомых уменьшалась скорость потребления кислорода в состоянии 4 по Чансу при внесении в питательную среду хлорида кадмия, тогда как в состоянии 3 этот показатель существенно не изменялся. В тоже время у “взрослых” (25 суток) насекомых динамика изменений исследуемых показателей была иной скорость потребления кислорода в состоянии 4 и 3 по Чансу в присутствии ксенобиотика увеличивались в 2 и 1,7 раза, соответственно, а дыхательный контроль достоверно уменьшался.

Показано, что развитие насекомых на среде, содержащей хлорид кадмия, приводило к усилению оксидативных повреждений белков (о котором судили по уровню карбонилированных белков) в тканях как молодых, так и взрослых мух, практически в одинаковой степени.

Анализ кривых дожития дрозофил свидетельствует о достоверном снижении как средней (в 1,6 раза), так и максимальной (в 1,2 раза) продолжительности жизни насекомых, получавших ксенобиотик, по сравнению с контрольной группой мух.

Таким образом, полученные результаты свидетельствуют о существенном возрастзависимом влиянии хлорида кадмия на функциональные свойства митохондрий и жизнеспособность дрозофил, вероятно, обусловленном интенсификацией свободнорадикальных процессов в тканях насекомых, что согласуется с приведенными в литературе и полученными в нашей лаборатории данными об аналогичном влиянии ксенобиотика на организм крыс. В целом, полученные данные могут свидетельствовать об универсальных механизмах геропромоторного действия ксенобиотика у животных моделей разного уровня организации.

ВЗАЄМОЗВЯЗОК ВІК-ЗАЛЕЖНИХ ЗМІН ФУНКЦІОНАЛЬНОГО СТАНУ

ЕНДОТЕЛІЮ СУДИН З АКТИВНІСТЮ ФІЗІОЛОГІЧНОГО КОМПЕНСАТОРНОГО

АНГІОГЕНЕЗУ У ПРАКТИЧНО ЗДОРОВИХ ЛЮДЕЙ РІЗНОГО ВІКУ

Лішневська В.Ю., Парасюк О.І.

Державна установа “Інститут геронтології імені Д.Ф. Чеботарьова НАМН України”, 04114, Київ.

sekret1310@rambler.ru Метою нашого дослідження було вивчення взаємозв’язку активності фізіологічного компенсаторного ангіогенезу з активністю внутрішньосудинного запалення, маркером якого є фактор некрозу пухлин, та NO-синтазною активністю ендотелію у практично здорових людей різних вікових груп.

Матеріали і методи. Було обстежено 10 практично здорових людей у віці 20-29 років, 10 практично здорових людей у віці 40-50 років, 10 практично здорових людей у віці 60-74 років. Функціональний стан ендотелію вивчали методом лазерної доплерівської флоуметрії на апараті ЛАКК-2 (Росія). Рівень фактору росту ендотелію судин (VEGF) визначали в сироватці крові методом імуноферментного аналізу (ІФА) за допомогою набору реактивів фірми Bender Medsystems (Австрія). Рівень фактору некрозу пухлин (TNF) визначали в сироватці крові методом ІФА за допомогою набору реактивів фірми Вектор бест (Росія).

Рівень капіляризації тканин оцінювали за допомогою методу телевізійної біомікроскопії на капіляроскопі ТМ-1.

Результати. При вивченні стану капіляризації тканин у людей різного віку було показано, що в осіб похилого віку спостерігали достовірне зниження щільності капілярів порівняно з групою людей молодого 12,51±0,45; та середнього віку 11,32±0,65. Однак за станом капіляризації тканин обстежені похилого віку розрізнялися і були розподілені на дві групи: із збереженою кількістю функціонуючих капілярів 60 % (кількість капілярів 10,18±0,12)*, і з капілярною розрідженістю 40 % обстежених (кількість капілярів 8,28±0,15)* (p0,05). Зважаючи на те, що рівень VEGF є доведеним показником активності ангіогенезу, нами було вивчено рівень даного показника в групах обстежуваних. Було показано, що у практично здорових людей 40-50 років спостерігається незначне підвищення рівню VEGF (220,2±11,6) пг/мл, порівняно із групою людей 20-30-річного віку (202,5±15,7) пг/мл. При визначенні рівня фактору росту ендотелію судин осіб похилого віку обстежені були розподілені на дві підгрупи: у 60 % досліджуваних його рівень продовжував зростати відповідно до вікових потреб (242,3±19,9)* пг/мл; а у 40 % спостерігали недостатнє підвищення рівня даного показника (221,5±10,2) пг/мл (p0,05). З метою визначення механізмів порушення активності ангіогенезу в осіб похилого віку нами було досліджено взаємозв’язок рівня фактору росту ендотелію судин з рівнем фактору некрозу пухлин та NO-синтазною активністю ендотелію. Згідно отриманих даних, з віком спостерігали підвищення рівня фактору некрозу пухлин (0,71±0,12) пг/мл у осіб молодого віку та (0,85±0,13) пг/мл у осіб середнього віку), однак його рівень в осіб літнього віку з нормальним (1,55±0,35)* пг/л та зниженим рівнем фактору росту ендотелію судин (1,68±0,43)* пг/мл не відрізнявся (p0,05). При вивченні NO-синтазної активності ендотелію суттєвих відмінностей відсотка приросту показника мікроциркуляції в групі практично здорових людей молодого і середнього віку не спостерігали. В групі людей похилого віку спостерігалась загальна тенденція до зниження рівня ендотелійзалежної вазодилатації порівняно з особами молодого 281,8±4,9 та середнього віку 269,1±4,6; однак у групі пацієнтів із збереженою капіляризацією тканин відсоток приросту показника мікроциркуляції був вірогідно вищий 219,3±4,1*, ніж у осіб із капілярною розрідженістю 197,5±3,6*(p0,05).

Висновки. Важливу роль фізіологічного компенсаторного ангіогенезу в забезпеченні достатнього рівня капіляризації тканин при старінні підтверджує наявність кореляційного зв’язку рівня фактору росту ендотелію судин із кількістю функціонуючих капілярів (r=0,38).

Вагомий внесок ендотелію в забезпеченні достатньої активності ангіогенезу доводить взаємозв’язок рівня фактору росту ендотелію судин з рівнем ендотелійзалежної вазодилатації (r=0,39). Активність компенсаторного ангіогенезу осіб похилого віку не пов'язана з активністю внутрішньосудинного запалення, про що свідчить відсутність кореляційного взаємозв’язку рівня фактору росту ендотелію судин з рівнем фактору некрозу пухлин.

ИЗМЕНЕНИЕ МАССЫ ПЕЧЕНИ И ДЫХАНИЯ МИТОХОНДРИЙ ПРИ

ВОССТАНОВИТЕЛЬНОМ КОРМЛЕНИИ ПОСЛЕ ГОЛОДАНИЯ У КРЫС

РАЗНОГО ВОЗРАСТА

Малеев В.А.

НИИ биологии Харьковского национального университета имени В.Н. Каразина, пл. Свободы, 4, 61022 Харьков, Украина bozhkov@univer.kharkov.ua В работе показано, что при кормлении животных, которые голодали трое суток, наблюдается увеличение относительной массы печени и дыхания митохондрий. У молодых животных эти изменения значительно более выражены. Масса печени у молодых животных после трех суток кормления увеличивается в среднем на 38 %, а у старых на 23 %. Дыхание митохондрий у молодых увеличивается на 20-29 %, а у старых животных значительно снижается в норме и практически не изменяется при откорме. Снижение окислительных процессов при старении приводит к повышенной генерации свободных радикалов и является основным механизмом повреждения мембран, ДНК и белков клетки [Анисимов, 2002;

Шабалин, 2002].

Известно, что при кормлении под влиянием инсулина в печени увеличивается синтез белков, липидов и гликогена. Увеличивается также содержание ионов калия и осмотически связанной воды, которые, по-видимому, играют значительную роль в увеличении массы печени.

Показано также, что стимуляция дыхания митохондрий гормонами обусловлена транспортом ионов калия и увеличением объема органелл [Halestar, 1989].

Установлено также значительное снижение активности КАТФ – канала в митохондриях при старении [Миронова и др., 2010], что является причиной нарушения регуляции окислительных процессов в митохондриях.

Снижение стимулирующего действия кормления на изученные показатели при старении, по-видимому, обусловлено и связано со снижением биологической эффективности инсулина и реакционной способности печени.

ВОЗРАСТЗАВИСИМАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ОТВЕТНОЙ РЕАКЦИИ

МИКРОСОМАЛЬНЫХ МЕМБРАН ПЕЧЕНИ НА ПОТЕНЦИАЛЬНЫЕ

ГЕРОПРОТЕКТОРЫ

Мензянова Н.Г., Никитченко Ю.В., Кузнецова Ю.А., Ковалева М.К., Божков А.И.

НИИ биологии Харьковского национального университета имени В.Н. Каразина, пл. Свободы, 4, 61022 Харьков mnage@inbox.ru В соответствии с эпигенетической концепцией старения [Божков, 2000; 2010] адаптациогенез сопровождается формированием индивидуальных вариантов эпигенетической (метаболической) памяти. Это может влиять на эффективность использующихся в настоящее время геропротекторов. В связи с этим возникает необходимость оценки эпигенетических вариантов на уровне микросомальных мембран в ответ на действие геропротекторов, обладающих гепатотропной активностью.

Известно, что экзометаболиты (ЭМ) мицелиального гриба Lentinus edodes обладают антиканцерогенной, антиоксидантной, иммуномодулирующей активностью. В нашей лаборатории были получены ЭМ L. edodes, которые обладали антиоксидантной активностью. В модельных системах общая АОА ЭМ достигала 34 %, активность перехвата ОН-радикалов – 27 %. Для сравнения, активность ОН-перехвата для маннита составляет 50 %.

В работе определяли влияние ЭМ L. edodes на содержание ТБК-активных продуктов, шиффовых оснований, активность двух мембраносвязанных ферментов глюкозо-6фосфатазы и глутатион-S-трансферазы на фоне введения ССl4 животным разного возраста.

Было обнаружено, что в контрольной группе молодых животных для микросомальных мембран были характерны два функциональных эпигенотипа, различающихся по активности свободнорадикальных процессов и активности мембраносвязанных ферментов (или которые различаются по уровню окислительно-восстановительного гомеостаза и активности мембраносвязанных ферментов). В контрольной группе старых животных для микросомальных мембран был выявлен только один функциональный эпигенотип, существенно отличающийся от эпигенетических вариантов молодых животных. Полученные результаты позволяют говорить о снижении уровня эпигенетической вариабельности мембранных функций в онтогенезе.

Введение ССl4 приводило к изменению активности свободнорадикальных процессов и мембраносвязанных ферментов. Специфичность ССl4-индуцированных перестроек определялась исходным функциональным эпигенотипом.

Комбинированное введение ЭМ L. edodes и ССl4 позволило сохранить функциональную активность микросомальных мембран на уровне контрольных вариантов в группе молодых и старых животных: содержание МДА, шиффовых оснований, активность ферментов достоверно не отличалась в контрольных и экспериментальных группах. Это позволяет говорить о протекторной активности ЭМ L. edodes.

Интерпретируя полученные результаты в свете эпигенетической концепции, можно заключить, что множественность ответных реакций на воздействия одинаковых факторов определяется особенностями функционального эпигенотипа, который сформировался на момент воздействия. Следовательно, особенности ответных реакций на поздних этапах онтогенеза свидетельствуют не о снижении «качества и адекватности» функционального ответа, а о том, что на «базе» конкретного возрастного эпигенотипа возможно формирование только определенных вариантов метаболических стратегий. Решающую роль в выборе того или иного варианта стратегии играет «качество» метаболической памяти.

АПОПТОТИЧЕСКИЕ ИЗМЕНЕНИЯ В МОЗГЕ ПРИ СТАРЕНИИ

И ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ ПАТОЛОГИИ

Михальский С.А., Белошицкий В.В. 1, Квитницкая-Рыжова Т.Ю.

ГУ “Институт геронтологии имени Д.Ф. Чеботарева НАМН Украины” ГУ “Институт нейрохирургии имени А.П.

Ромоданова НАМН Украины” Киев, Украина, morphology@geront.kiev.ua Целью работы явился анализ особенностей апоптотической гибели клеток мозга (кора, гиппокамп и гипоталамус) при старении и двух видах экспериментальной патологии (ЭП):

тяжелой диффузной черепно-мозговой травме (ЧМТ) через 5 и 10 дней после травмы (крысы) и экспериментальном стрептозотоцининдуцированном сахарном диабете (СД) через 5 недель после развития болезни (мыши). Применялись световая и электронная микроскопия, TUNEL-метод определения апоптоза, высчитывался апоптотический индекс (АИ).

АИ у старых интактных животных оказался в 5-6 раз больше, чем у взрослых. И при ЧМТ, и при СД наибольшая выраженность апоптоза наблюдалась в коре. При СД меньшая доля апоптотических клеток (АпК) наблюдалась в гиппокампе, еще меньшая – в гипоталамусе. При ЧМТ апоптоз в гипоталамусе через 5 и 10 суток после травмы был выражен сильнее, чем в гиппокампе. При этом, отмеченная нами значительная потеря нейронов в СА1-зоне гиппокампа на 10-е сутки после ЧМТ и незначительные показатели АИ в этот период, а также на 5-е сутки, позволили предположить, что основная гибель клеток происходит в первые 48 часов после травмы, что сочетается с данными литературы.

Меньший уровень апоптоза в мозге крыс на 10-е сутки после травмы в сравнении с 5-и свидетельствует о затухании этого процесса во времени. Все это отражает разную интенсивность и продолжительность апоптотических процессов в разных зонах мозга. И при ЧМТ и при СД большую часть АпК составляют глиоциты, меньшую – нейроны, еще меньшую – эндотелиальные клетки кровеносных капилляров.

АИ существенно возрастает с возрастом. В условиях ЭП при старении происходит еще более выраженный рост количества АпК. Анализ АИ во всех экспериментальных группах показал, что отличие между взрослыми и старыми более существенное, чем отличие между контрольными животными и животными с ЭП одного возраста.

При оценке неблагоприятных влияний на мозг необходимо учитывать, что базовый уровень апоптоза у старых животных выше, чем у взрослых.

ОНТОГЕНЕТИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ АКТИВНОСТИ ПРОТЕАЗ

В ТКАНИ МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ

Мотрук Н.В., Вовчук И.Л.

Одесский национальный университет имени И. И. Мечникова, ул. Дворянская, 2, 65026 Одесса, Украина ntvl@ukr.net В предыдущих исследованиях нами установлены высокие коэффициенты корреляции активности протеаз и возраста женщин, что позволило предположить наличие причинноследственных связей между этими факторами.

Цель работы изучить влияние возраста и склонности к новообразованиям ткани молочной железы (МЖ) на активность компонентов системы протеолиза.

Расчет влияния факторов проводили с помощью двухфакторного дисперсионного анализа.

Независимыми переменными были возраст женщин (ВЖ) и прогрессия новообразований (ПН). За нулевую точку отсчета принимали активность ферментов немалигнизированной ткани МЖ, активность компонентов системы протеолиза доброкачественных и злокачественных новообразований определяли как этапы озлокачествления опухоли. Зависимой переменной была активность: катепсин-D-подобных протеиназ (КД), катепсин-L-подобных ферментов (КЛ), трипсиноподобных протеиназ (ТП), ингибитора трипсина (ИТ), карбоксипептидазы А (КА), матриксной металлопротеиназы (ММП-2).

Полученные коэффициенты детерминации показали, что изменение активности КД на 21,3 % зависело от ВЖ и на 48 % от ПН, взаимодействие факторов обеспечивало 30,6 % активности. Изменение активности КЛ на 62,4 % детерминировано ПН. Влияние ВЖ и взаимодействие факторов на активность КЛ составило 12,2 % и 24 % соответственно.

Активность ТП существенно зависела от суммарного влияния факторов (73,3 %), и на 26,4 %. от ВЖ. На активность ИТ наибольшее влияние оказывал ВЖ 41,6 %, ПН и сочетанное влияние факторов составили 26,8 % и 31,0 % соответственно. Повышение активности ММПна 52,4 % детерминировано ПН, сочетанное влияние факторов составило 41,8 %. На активность КА большее влияние оказывала ПН (50 %), меньшее ВЖ (12,5 %), а сочетанное влияние факторов составило 36 %.

Обобщая результаты проведенных исследований, нам удалось выделить несколько групп ферментов. К первой группе принадлежит ИТ, активность которого зависит только от ВЖ. Вторую группу составили ферменты, активность которых зависит только от ПН: КД, КЛ, ММП-2, КА. К третьей группе относятся протеазы, активность которых зависит как от ВЖ, так и от ПН: все исследованные компоненты системы протеолиза, за исключением КЛ.

«СОВЕТСКИЙ СОЮЗ – СТРАНА ДОЛГОЛЕТИЯ» РЕТРОСПЕКТИВА

Нагорный А.В., Божков А. И., Леонова И. С.

НИИ биологии Харьковского национального университета имени В. Н. Каразина Пл. Свободы, 4, 61022 Харьков, Украина bozhkov@univer.kharkov.ua В 1951 гг. НИИ биологии ХГУ готовил к печати книгу «Советский Союз страна долголетия», в рамках подготовки которой в областях союзных республик составляли списки долгожителей, живых на момент переписи, возраст которых был документально подтвержден.

Долгожители были проанкетированы. По ряду причин книга не была завершена, значительная часть списков и анкет были утеряны. Нами были собраны и проанализированы сохранившиеся списки и анкеты, касающиеся территории Украины. Была сформирована выборка долгожителей старше 99 лет, в которую вошли 25 женщин крестьянок, жительниц сел и городов областного подчинения различных регионов современной Украины.

Анализ наследуемости долголетия показал, что лишь у 20 % женщин – долгожителей (ДЖ) оба родителя прожили свыше 80 лет, причем в 85 % случаев это был отец, что, возможно, связано с высокой женской смертностью при родах. У всех женщин были дети, причем 65 % имело более 6 детей. Следует отметить, что у 20 % ДЖ на момент анкетирования детей в живых не было. Интересным является факт, что последние успешные роды у 16 % ДЖ были от 51 года и старше.

У 48 % не сохранилось ни одного зуба, менее 20 % имели от 6 и более зубов. Из органов чувств в наибольшей степени страдал слух лишь 34 % ДЖ слышали хорошо, около 12 % слух практически утратили. Отличное и хорошее зрение сохранили 82 % долгожительниц, ясную и четкую память 52%. У 90 % ДЖ были густые или нормальные волосы, причем у 30 % седины не было или она была незначительной. У большинства ДЖ при анкетировании была измерена температура тела, которая составила 36,39 ± 0,05.

Отдельно следует отметить активность ДЖ: продолжали работать на колхозных полях и в торговле 12 %, домашней работой были заняты 72 % (готовка, уборка, ношение воды, топка печи 60 %, работа на огороде 16 % уход за скотом – 12 %) и только 28 % не выполняли работу в связи с утратой зрения, слуха, плохой подвижностью. Досуг женщины посвящали: заботе о внуках и правнуках 20 %, шитью и вышиванию 20 %, домашней работе 12 %, чтению и пению 12 %, поездкам в гости 12 % и лишь 24 % в свободное время отдыхали и спали.

Никогда не болели 32 % ДЖ, однако остальные 68 % перенесли ряд тяжелых заболеваний: сыпной тиф 32 %, брюшной тиф 16 %, малярию 16 %, родовые осложнения 16 %, натуральную оспу 12 %, ревматизм 8 %, грипп 8 %, корь 8%, воспаление легких 8 %, заболевания ЖКТ 8 %, нервные потрясения 8 %, паратиф 4 %, туляремию 4 %. На момент анкетирования 32 % не имели жалоб на самочувствие.

Основными жалобами у других было общее недомогание 36 %, боли в конечностях 28 % и мышцах 8 %, снижение зрения или слуха 20 %.

Рацион питания в молодости и зрелости 40 % ДЖ считали хорошим и разнообразным, обычным сельским 36 %, 20 % затруднились однозначно оценить и лишь 4 % сочли питание плохим и скудным.

На момент анкетирования 28 % сочли, что их питание стало хуже, и лишь 24 % продолжали питаться полноценно и хорошо, плохое питание получали 8 % женщин. Ранее основу рациона ДЖ составляли: молочная пища 20 %, овощи и каши 20 %, мясо и яйца 16 %, сало 16 %, хлеб 12 %, борщи и супы 8 %, рыба 8 %, фрукты, сахар и варенье 8 %.

На момент анкетирования основу рациона составляли:

молочная пища 24 %, мясо и яйца 20 %, овощи и каши 16 %, хлеб 16 %, борщи и супы 16 %, фрукты и сахар 12 %, мамалыга 4 %, сало 4 %, полностью исчезла из рациона рыба. Ни одна женщина-долгожительница не курила, 32 % никогда не употребляли алкоголь.

Старыми считали себя 96 % ДЖ, причем 28 % стали считать себя таковыми в последние 1-5 лет, причем снижением физической силы и проблемами со здоровьем объяснили это только 34 %, тогда как 24 % считали причиной паспортный возраст, смерть мужа, прекращение трудовой деятельности, а 12% пережитую войну и голод. Среди основных причин долголетия были названы хорошее здоровье, питание и условия жизни 44 %, отсутствие вредных привычек 8 %, спокойный характер 8 %, наследственность 8 %.

ИЗУЧЕНИЕ ЗАЩИТНОГО ДЕЙСТВИЯ МЕЛАТОНИНА НА МОДЕЛИ

ИНДУЦИРОВАННОГО ЦИРРОЗА ПЕЧЕНИ, С ПОМОЩЬЮ АНАЛИЗА

СОДЕРЖАНИЯ 8-ОКСО-2’-ДЕЗОКСИГУАНОЗИНА Невредимова Т.С.1, Клюс К.А.2, Мармий Н.В.2, Налобин Д.С.2, Чернышева М.Б.2, Василегина Ю.И.2, Супруненко Е.А.2, Беспятых А.Ю.2, Есипов Д.С.2 Московский государственный университет тонких химических технологий им. М.В.Ломоносова, 2Московский государственный университет им. М.В. Ломоносова, г. Москва, Россия NevredimovaTS@gmail.com 8-оксо-2’-дезоксигуанозин является широко исследуемым продуктом воздействия активных форм кислорода на ДНК. Неоднократно отмечалось повышение уровня данного биомаркера как при старении, так и при различных заболеваниях, этиология и патогенез которых связаны с окислительным стрессом.

Данная работа посвящена изучению гепатопротекторного действия мелатонина, проявляемого благодаря его антиоксидантным свойствам, на модели искусственно вызванного цирроза печени у мышей. Цирроз вызывали введением внутрибрюшинно CCl4 в персиковом масле. Критерием оценки защитного действия препарата было изменение отношение [8-oxo-dG]/[dG].

В литературе сообщается об антиоксидантном, геропротекторном, иммунорегуляторном действии мелатонина. Однако в клинике на настоящий момент он используется только для лечения бессонницы и других сбоев суточного ритма. В связи с этим актуально исследование других аспектов применения этого лекарственного препарата, в частности его антиоксидантного действия.

Животные были разделены на 5 групп: 1) контрольная группа (группа интактных животных) – животные не подвергались никаким стрессорным воздействиям; 2) опытная группа животные, которым внутрибрюшинно вводили только персиковое масло;

3) опытная группа – животные, которым внутрибрюшинно вводили CCl4; 4) опытная группа – животные, которым внутрибрюшинно вводили CCl4, и поили мелатонином;

5) опытная группа – животные, которых поили мелатонином.

Количество 8-oxo-dG и dG в гидролизате ДНК, выделенной из печени мышей, оценивали с помощью ОФ ВЭЖХ (Beckman Gold, США) с применением амперометрического детектора (Химавтоматика, Россия).

Результаты исследования показали изменение отношения [8-oxo-dG]/[dG] в ДНК печени мышей под действием тетрахлорметана, мелатонина, стрессирующих воздействий.

Была оценена возможность использования мелатонина в качестве антиоксидантного и гепатопротекторного препарата при остром токсическом воздействии на печень. Показана возможность использования 8-oxo-dG в качестве биомаркера при проверке действия лекарственных препаратов.

ВЛИЯНИЕ БИОПОЛИМЕРА ИЗ ТКАНЕЙ РАПАНЫ С СЕЛЕНОМ

ОРГАНИЧЕСКИМ НА СЕЛЕНЗАВИСИМУЮ ГЛУТАТИОНПЕРОКСИДАЗНУЮ

АКТИВНОСТЬ В ТКАНЯХ СТАРЫХ КРЫС, ПОЛУЧАВШИХ КАЛОРИЙНО

ОГРАНИЧЕННУЮ ДИЕТУ

Никитченко Ю.В., Дзюба В.Н., Овсянникова Т.Н. 1, Битютская О.Е. 2, Бондарь В.В.

НИИ биологии Харьковского национального университета имени В.Н. Каразина, пл. Свободы, 4, 61022 Харьков, Украина;

Харьковский национальный университет имени В.Н. Каразина, г. Харьков, Украина;

Керченский государственный морской технологический университет, г. Керчь, АР Крым, Украина yunikitchenko@mail.ru Полученные ранее нами данные свидетельствуют, что применение калорийно ограниченной диеты (КОД), которая увеличивает продолжительность жизни животных, приводит к увеличению активности глутатионзависимых антиоксидантных ферментов, особенно селензависимой глутатионпероксидазы (Se-ГП) в крови, сердце и печени крыс.

Вместе с тем, следует отметить, что на поздних этапах онтогенеза у этих подопытных животных Se-ГП активность в плазме и эритроцитах крови значительно снижается. Поэтому не исключено, что дополнение калорийно ограниченного рациона животных биологически активными веществами, способными увеличивать активность Se-ГП, может привести к дополнительному увеличению продолжительности их жизни.

Основываясь на ранее полученных данных, свидетельствующих о способности биополимера из тканей рапаны (БР), дополненного селеном органическим (Se-орг), приводить к нормализации активности Se-ГП в печени и крови крыс, получавших несбалансированное по содержанию животных белков и витаминов антиоксидантного ряда питание, в настоящей работе была исследована способность БР + Se-орг увеличивать активность Se-ГП печени и крови очень старых, 34-месячных крыс, которые с одномесячного возраста содержались на КОД.

Установлено, что в ответ на 12-дневное дополнение калорийно ограниченного рациона БР + Se-орг глутатион-S-трансферазная и глутатионредуктазная активности в печени и содержание ферментативно-активного церулоплазмина в крови 34-месячных животных не изменялись, а Se-ГП активность в постмитохондриальной фракции печени и плазме крови – существенно возрастала. Так в плазме крови исследуемая активность увеличивалась на 24 %, а в постмитохондриальной фракции печени – на 41 % по сравнению с уровнем этой активности у крыс, получавших только калорийно ограниченный рацион.

Таким образом, полученные данные свидетельствуют, что уже через 12 дней после начала дополнения калорийно ограниченного рациона БР + Se-орг происходит достоверное увеличение Se-ГП активности в печени и крови подопытных крыс. Такое увеличение активности селензависимой глутатионпероксидазы – основного фермента, утилизирующего активные формы кислорода, азота и липидов, – может быть основой для дополнительного увеличения продолжительности жизни этих подопытных животных.

ИЗМЕНЕНИЕ СОСТОЯНИЯ ПРООКСИДАНТНО-АНТИОКСИДАНТНОЙ

СИСТЕМЫ И ВЫЖИВАЕМОСТИ КРЫС ПРИ ИЗБЫТОЧНОМ ПИТАНИИ

В РАННЕМ ПЕРИОДЕ ПОСТНАЛЬНОГО ОНТОГЕНЕЗА И ЕГО КОРРЕКЦИЯ

L-АРГИНИНОМ Никитченко Ю.В.

НИИ биологии Харьковского национального университета имени В.Н. Каразина, пл. Свободы, 4, 61022 Харьков, Украина yunikitchenko@mail.ru Работа посвящена изучению основных закономерностей изменения состояния прооксидантно-антиоксидантной системы организма (содержание гидроперекисей липидов, восстановленного и окисленного глутатиона, активность селензависимой и селеннезависимой глутатионпероксидазы, глутатион-S-трансферазы, глутатионредуктазы, супероксиддисмутазы, каталазы, NADP-зависимых дегидрогеназ и NO-синтазы) и выживаемости крыс при моделировании ускоренного старения избыточным питанием в раннем периоде постнатального онтогенеза, а также возможности коррекции этих изменений L-аргинином.

Установлено, что избыточное питание в раннем периоде постнатального онтогенеза приводило к достоверному уменьшению выживаемости крыс, и это коррелировало со снижением активности глутатионзависимых антиоксидантных ферментов (особенно активности селензависимых пероксидаз) в печени и крови. При этом обнаружено, что NOсинтазная активность в тканях печени, сердца, мозга и почек подопытных крыс разного возраста была существенно выше, чем у контрольных животных.

Поскольку NO-радикалы проявляют антиоксидантное действие, обнаруженное увеличение NO-синтазной активности в тканях подопытных животных может быть адаптивным ответом организма на снижение активности селензависимых глутатионпероксидаз. Важно также отметить, что введение крысам в течение 10 дней Lаргинина, субстрата NO-синтазы, приводило к значительному увеличению активности селензависимой глутатионпероксидазы в сыворотке крови (на 49,2 %) и постмитохондриальной фракции печени (на 86,1 %).

В связи с вышеизложенным представляло интерес исследовать влияние L-аргинина на выживаемость контрольных крыс и крыс, получавших избыточное питание в раннем периоде постнатального онтогенеза.

Установлено, что добавление L-аргинина в питьевую воду 23-месячных крыс, получавших избыточное питание, приводило к увеличению их выживаемости. Сравнение кривых выживания (критерий Гехана с поправкой Йейтса) подопытных крыс, получавших и не получавших L-аргинин, показало их достоверное различие. При этом последнее подопытное животное из группы крыс, не получавших L-аргинин, погибло в 34 месяца, а из группы крыс, получавших L-аргинина – в 36 месяцев. Последнее контрольное животное пало также в 36 месяцев. В настоящее время возраст четырех контрольных крыс, получающих с 23-месячного возраста L-аргинин, составляет 37,5 месяцев. Эксперимент продолжается.

В целом, полученные данные свидетельствуют, с одной стороны, о ведущей роли селензависимых глутатионпероксидаз и NO-синтаз в механизмах ускоренного старения организма, а с другой стороны, – о перспективности дальнейшего изучения L-аргинина в качестве геропротекторного средства, эффективного не только при ускоренном, но и при естественном старении.

ВОЗРАСТНЫЕ ОСОБЕННОСТИ «СТРАТЕГИИ» ЗАЩИТНОГО ДЕЙСТВИЯ

ЭКСТРАКТА ЧЕСНОКА ПРИ ИНТОКСИКАЦИИ ХЛОРИДОМ КАДМИЯ

Падалко В.И., Козлова Е.В., Леонова И.С.

НИИ биологии Харьковского национального университета имени В. Н. Каразина, пл. Свободы 4, 61022 Харьков, Украина pvi-55@mail.ru Для современного индустриального общества характерен высокий уровень загрязнения окружающей среды ксенобиотиками, в частности, кадмием, негативное действие которого на живые организмы достаточно хорошо известно.

Целый ряд литературных данных, а также предварительные результаты, полученные в нашей лаборатории, свидетельствуют о выраженных гепатопротекторных свойствах экстракта чеснока (Allium sativum L.). Настоящая работа посвящена исследованию роли возраста в позитивных эффектах растительного экстракта на модели индуцированного кадмием оксидативного стресса.

Полученные в работе результаты свидетельствуют о том, что чеснок обладает способностью уменьшать проявления гепатотоксичности хлорида кадмия, выраженной в разной степени у молодых (3-4 мес.) и старых (30 мес.) самцов крыс линии Вистар.

Так, молодые животные более «чувствительны» к используемым дозам и срокам введения ксенобиотика, а гепатопротекторные свойства чеснока в этом возрасте выражены в меньшей степени, о чем может свидетельствовать достаточно высокий уровень карбонилированных белков, не в полной мере восстановление функционирования микросомальной монооксигеназной системы и активности антиоксидантных ферментов, но при этом следует отметить достаточно высокий уровень неферментативной антиоксидантной защиты у животных, получавших хлорид кадмия на фоне введения им экстракта чеснока.

В тоже время, для старых животных последствия острого введения ксенобиотика были не столь существенны, поскольку у этих крыс практически не изменялся общий уровень мембраносвязанного пула цитохромов Р-450 и уровень гидроперекисей липидов в условиях опыта. Кроме того, введение экстракта чеснока старым животным приводило к практически полному устранению роста уровня карбонилированных белков и снижения активности антиоксидантных ферментов, обусловленных введением хлорида кадмия.

Полученные результаты в целом подтверждают многочисленные данные литературы об активации хлоридом кадмия оксидативного стресса в организме подопытных животных, и, вероятно, позволяют заключить, что экстракт чеснока может оказывать защитное действие при остром контакте с ксенобиотиком, однако возраст организма может вносить существенные особенности в саму «стратегию», механизмы его защитного действия. Мы предполагаем, что у молодых животных защитное действие чеснока в большей мере связано с поддержанием адекватного уровня неферментативной антиоксидантной защиты, тогда как у старых животных – с активацией ферментативной антиоксидантной защиты.

НЕЙРОПСИХОЛОГИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ ИНДИВИДУАЛЬНЫХ РАЗЛИЧИЙ

ВЕГЕТАТИВНОЙ РЕГУЛЯЦИИ СЕРДЕЧНОГО РИТМА ПРИ ЭМОЦИОНАЛЬНЫХ

ПЕРЕЖИВАНИЯХ

Прокопенко Н.А.

Государственное учреждение “Институт геронтологии НАМН Украины”, Киев naprok@bigmir.net Эмоциональные свойства – наиболее устойчивые характеристики человека, которые тесно связаны как с темпераментом, так и с характером человека. В условиях моделирования эмоционального стресса можно глубже понять реакции организма на стрессирующее воздействие в зависимости от индивидуальных особенностей личности. На примере эмоций ярко проявляются интеграция и взаимные влияния нервных и гуморальных механизмов, обеспечивающих регуляцию физиологических функций.

Исследовали особенности вегетативных реакций, связанных с эмоциональными переживаниями, у лиц с различными характеристиками индивидуальности.

Эмоциональные состояния моделировали, предлагая испытуемым представить себе ситуации, вызывающие чувства радости (положительные эмоции) и горя (отрицательные эмоции). В ходе таких эмоциональных проб исследовали кардиоинтервалографические показатели испытуемых. У обследуемых лиц с ярко выраженными «внешненаправленными» реакциями на эмоциогенные влияния (экстравертов, экстерналов и лиц с экстрапунитивным типом реагирования) симпато-парасимпатические воздействия в ходе регуляции сердечного ритма преобладали над центральными влияниями. И, наоборот, при высоком уровне интроверсии у обследуемых лиц наблюдали сдвиги вегетативного баланса в сторону активации симпатоадреналового звена, относительно низкая эффективность барорефлекторной регуляции и напряжение регуляторных систем организма. Физиологическая адаптация к действию разнообразных стрессоров, в том числе и эмоциональных, осуществляется в основном системой: кора головного мозга – гипоталамус – гипофиз – кора надпочечников. В свою очередь, выброс адреналина надпочечниками активирует ретикулярную формацию, а через нее – гипоталамус и лимбическую систему мозга. Таким образом, можно предполагать, что для экстравертов характерны более высокие пороги эмоциональной чувствительности, соответствующие более высокому порогу активации ретикулярной формации и более выраженным тормозным влияниям коры на подкорковые образования. Поэтому экстраверты испытывают в целом более слабую, а интроверты – более интенсивную активацию регуляторных механизмов сердечно-сосудистой системы в ответ на действие экстеро- и интерорецептивных раздражителей.

СТАРОСТЬ, ДЕСИНХРОЗ И НЕОПЛАЗИЯ ПРОСТАТЫ

Россихин В.В.1, Яковенко М.Г.2, Корниенко Е.М.2, Дереча Л.Н.3 Харьковская медицинская академия последипломного образования Харьковский национальный университет имени В.Н. Каразина Харьковский НИИ судебно-медицинских экспертиз имени Боккариуса Доброкачественная гипертрофия предстательной железы (ДГПЖ) является распространенным заболеванием лиц пожилого возраста. 85 % мужчин в возрасте старше 65 лет страдает расстройствами мочеиспускания, связанными с ДГПЖ. Вместе с тем, возрастные механизмы пролиферации простаты не являются в полной мере окончательно изученными.

Нами изучены 465 случаев ДГПЖ у мужчин в возрасте от 47 до 94 лет. Отмечается «омоложение» ДГПЖ, которая достаточно часто выявляется по данным УЗ-сканирования в возрасте 40-45 лет (36 чел.). В 93 % наблюдений раннее выявление сочетается с развитием возрастной дальнозоркости, снижением физической активности и поседением. У всех пациентов с «молодой» ДГПЖ отмечается десинхроз по пробе Зимницкого и расчетным ритмам Агаджаняна-Котельника (учет спастических пароксизмов, а также физических показателей по ручной динамометрии). При этом клинические проявления (ДГПЖ II ст.) возникают значительно позже увеличения железы (через 2-4 года), выявляемого при УЗИ.

У 74 % пациентов клиника ДГПЖ усугубляется явлениями сопутствующего хронического простатита, имеющего свое патогенетическое начало в молодом или среднем возрасте. При этом субъективное улучшение от лекарственной терапии быстрее достигается при снятии ирритативного синдрома, определяемого хроническим простатитом, нежели обструктивного синдрома, зависящего от гиперпластического процесса. Всем пациентам с ДГПЖ и сомнительной УЗ-картиной показано исследование уровня простатического антигена (PSA).

В случае превышения PSA 7-10 нмоль/л следует прибегать к биопсии простаты (16 чел.) с целью выявления рака (13 наблюдений). Из 13 больных с раком простаты 12 перенесли в различном возрасте аппендэктомию, что, вероятно, неблагоприятно сказывается в процессе старения на состояние региональной (в данном случае тазовой) иммунореактивности.

ПРОГНОЗИРОВАНИЕ НЕОПЛАЗИИ ПРОСТАТЫ PSA-ТЕСТОМ

Россихин В.В.1, Яковенко М.Г. 2, Корниенко Е.М. 2, Дереча Л.Н. 3 Харьковская медицинская академия последипломного образования Харьковский национальный университет им. В.Н. Каразина Харьковский НИИ судебно-медицинских экспертиз имени Боккариуса Рак простаты (РП) является гормональным возрастозависимым заболеванием, частота которого, учитывая демографическую ситуацию, нарастает.

Целью настоящего исследования явилась оценка однократного теста на простатспецифический антиген (PSA) в возрасте 44-50 лет как долговременного предиктора РП.

Материалы и методы исследования: Измеряли уровень PSA в образцах крови у 236 мужчин (2001-2010 г.г.) с диагностированным впоследствии РП, и у 471 пациента, составившего контрольную группу. Возраст всех мужчин лежал в диапазоне от 43 до 50 лет, но 90 % пациентов были 44-50 лет.

Результаты. Установлено, что даже небольшое увеличение уровня общего PSA (tPSA) заметно увеличивает риск РП в последующем. У мужчин с уровнями tPSA от 1,01 до 2,00 нг/мл, которые в настоящее время не считаются подозрительными на РП, отмечалось увеличение риска РП более чем в пять раз, в сравнении с мужчинами, имеющими уровни tPSA не более, чем 0,5 нг/мл (в подобном шведском исследовании "Malm Preventive Project увеличение риска РП оценено в 7 раз). Вероятность диагноза РП в возрасте 75 лет была 1,0-7,5 % для мужчин с уровнями tPSA в начале исследования менее чем 0,50 нг/мл, по сравнению с 32 % для пациентов с уровнями tPSA в начале исследования, по крайней мере, 2,0 нг/мл.

Выводы: Полученные результаты предполагают, что проведение единственного PSAтеста в возрасте 44-50 лет может позволить стратифицировать население по группам риска рака простаты и необходимости последующего скрининга на это заболевание. При этом стратификация позволит идентифицировать мужчин с высоким риском и недостаточной мотивацией для участия в регулярных обследованиях, и, таким образом, увеличить эффективность скрининга.

МОДЕЛЬ ОПРЕДЕЛЕНИЯ МЕТАБОЛИЧЕСКОЙ ПАМЯТИ И ФОРМИРОВАНИЯ

ВОЗРАСТЗАВИСИМЫХ СТРАТЕГИЙ АДАПТАЦИИ

Сидоров В.И., Кургузова Н.И., Длубовская В.Л., Суворова А.Д., Криворучко Т.В., Божков А.И.

НИИ биологии Харьковского национального университета имени В.Н. Каразина, пл. Свободы, 4, 61022 Харьков, Украина, bozhkov@univer.kharkov.ua В институте биологии на протяжении последних 10 лет разрабатывается эпигенетическая концепция старения, согласно которой старение неспецифический интегральный процесс, который формируется как следствие накопления эпигенетической – метаболической памяти в результате непрерывного процесса адаптации. Одним из следствий этого положения является то, что с возрастом не утрачивается способность к адаптации (как принято считать), а изменяется стратегия адаптации или «варианты» адаптивного ответа. С целью развития этой концепции была разработана биологическая модель, демонстрирующая эффект метаболической памяти к токсическому действию сернокислой меди.

Суть модели сводится к тому, что у экспериментальных животных формируется резистентность к сернокислой меди. Для этого им последовательно трехкратно вводят сернокислую медь в дозе, которая соответствует LD33. После этого определяют устойчивость к летальным дозам сернокислой меди спустя разное время после формирования резистентности, т. е. определяют время сохранения гормезисного эффекта.

Оказалось, что в наибольшей степи сохранялась устойчивость к летальным дозам токсиканта спустя 24 часа 30 сут. 15 сут. 45 сут. необходимо отметить, что если животным предварительно не вводили сернокислую медь по адаптивной схеме, то они погибали спустя 2-6 часов. Следовательно, сохранение гормезисного эффекта зависит от времени формирования адаптивного ответа и эта зависимость не линейная. Эти результаты указывают на наличие сложных механизмов формирования метаболической памяти.

Важно то, что у старых животных гораздо дольше сохранялась метаболическая память о прошедших адаптивных процессах. Большая устойчивость и сохранение памяти об устойчивости у старых животных объясняется выбором иной стратегии адаптации. Было обнаружено, что у старых животных больше ионов меди связывалось со специфическими медесвязывающими белками в цитозоле печени, и имел место другой паттерн внутриклеточного распределения ионов меди.

На основании полученных данных предложена модель, согласно которой изменение условий существования приводит к тому, что реализуется только один из возможных альтернативных метаболических паттернов. Выбор метаболического паттерна, обеспечивающего устойчивость, определяется уже имеющимися эпигенетической и метаболической памятью.

ЗАВИСИМОСТЬ ПРОДОЛЖИТЕЛЬНОСТИ ЖИЗНИ ПАЦИЕНТОВ

С МИОДИСТРОФИЕЙ ДЮШЕННА-БЕККЕРА ОТ СТРУКТУРНОФУНКЦИОНАЛЬНЫХ НАРУШЕНИЙ В МУТАНТНЫХ ФОРМАХ ДИСТРОФИНА

Соколик В.В., Шатило А.В.

ГУ «Институт неврологии, психиатрии и наркологии АМН Украины», Харьков, Украина, Sokolik67@rambler.ru Мышечные дистрофии Дюшенна (МДД) и Беккера (МДБ) являются моногенными заболеваниями, которые связаны с целым пулом мутаций одного из крупнейших генов эукариот (DMD), кодирующего белок дистрофин (3686 а. о.). Около 98 % структуры гена DMD составляют интроны, остальная часть приходиться на 79 экзонов и 7 промоторов, регулирующих синтез изоформ белка, специфичных для различных тканей. В скелетных мышцах дистрофин расположен на внутренней поверхности мембраны миоцитов, при этом его N-концевой домен взаимодействует с актином цитоскелета, а С-концевой домен – с комплексом белков сарколеммы с формированием дистрофин-ассоциированного комплекса.

Этот комплекс участвует в передаче силы мышечного сокращения и является важным компонентом, сохраняющим структуру мышечных волокон. Манифестацию генетических мутаций можно подразделить на две группы: МДД вызывают все мутации (делеции и дупликации), которые приводят к сдвигу рамки считывания, что приводит к образованию стоп-кодонов, в то время как МДБ индуцируют менее фатальные мутации (делеции и SNP), которые не нарушают структуру рамки считывания, но транслирующийся дистрофин лишь частично функционален. Примечательно, что при МДБ делеция половины гена DMD сопровождается развитием очень незначительных нарушений. Данное обстоятельство наводит на мысль о принципиальном значении для функциональности белка только его отдельных доменов, а не полноформатного полипептида.

Цель работы состояла в моделировании структурных нарушений дистрофина при ряде мутаций, ассоциированных с МДД и МДБ, анализе их эффекта на функциональность белка, а также прогнозе продолжительности жизни носителей данных мутаций.

В настоящее время экспериментальные данные имеются только для двух небольших Nи С-концевых фрагментов дистрофина: файлы 1DXX: (1-246 а. о.) и 1EG3: (3046-3306 а. о.) из PDB, а для остальной его части ничего не известно. Мы использовали разработанный ранее метод моделирования структурного шаблона белка по детерминирующей его нуклеотидной последовательности для моделирования in silico нативной и мутантных форм этого белка. Был изучен эффект 29 мелких делеций, 8 крупных делеций, 7 мелких инсерций, 2 дупликаций и 63 SNP (12 миссенс-мутаций и 51 нонсенс-мутаций). Результаты были получены в виде 3D структур и pdb. файлов полипептидов. Анализ полученных структур показал большую катастрофичность мутаций при МДД, по сравнению с МДБ, которая проявлялась в синтезе коротких, нефункциональных N-концевых фрагментов дистрофина, что сказывалось на существенном снижении продолжительности жизни пациентов (в 1,5 – 2 раза).

ВЛИЯНИЕ GSM ИЗЛУЧЕНИЯ НА СОСТОЯНИЕ И РЕАКТИВАЦИЮ АСТРОЦИТОВ

НОВОРОЖДЕННЫХ И ПОЛОВОЗРЕЛЫХ КРЫС

Соляник И.В., Руденко В.В., Дяченко Л.М., Кириченко С.В., Недзвецкий В.С.

Днепропетровский национальный университет имени Олеся Гончара, г. Днепропетровск, Украина nedzvetskyvictor@ukr.net Стремительный рост числа мобильных телефонов, в которых используется электромагнитное поле сверхвысокой частоты (СВЧ), может быть одной из причин неблагоприятного влияния на процессы дифференциации нервных клеток в ходе развития ЦНС. Недавние исследования показали присутствие молекулярных, клеточных и функциональных нарушений при хроническом воздействии СВЧ. Развивающийся мозг рассматривается как наиболее чувствительный к действию различных факторов.

Целью работы было изучение экспрессии и состава белка глиальных промежуточных филаментов, показателей оксидативного стресса в мозге новорожденных и половозрелых крыс при хроническом облучении СВЧ 900 МГц.

Экспозицию радиочастоты проводили на протяжении 45-ти минут 5 раз в неделю 30 дней (900 MГц, 1/8 коэффициент заполнения длины импульса, модуляция 217 Гц, средняя плотность мощности 0,02 мВ/cм2). Содержание и состав глиального фибриллярного кислого белка (ГФКБ) в гиппокампе, коре и мозжечке определяли методом иммуноблотинга, содержание продуктов перекисного окисления липидов тест-набором LPO-586.

В мозге половозрелых крыс выявлено достоверное возрастание экспрессии ГФКБ во всех исследованных отделах мозга. Наиболее значительные отличия отмечены в гиппокампе и коре (в 1,67 и 1,51 раза соответственно) в сравнении с группой контроля. Такое увеличение ГФКБ свидетельствует о развитии астроглиоза – характерного ответа нейроглии на действие СВЧ. В мозге новорожденных крыс после 30 дней экспозиции СВЧ рост ГФКБ был достоверно более высоким по сравнению с группой половозрелых облученных крыс (в 1,37 и 1,31 раза соответственно).

Во всех исследованных отделах мозга обеих экспериментальных групп показано значительное увеличение содержания деградированных полипептидных фрагментов ГФКБ, что может быть результатом протеолитической деградации промежуточных филаментов. В этих же группах отмечено достоверное увеличение конечных продуктов перекисного окисления липидов. Таким образом, астроглиоз в мозге обеих групп ассоциирован с развитием оксидативного стресса.

Полученные результаты свидетельствуют о дифференциальных нарушениях в мозге новорожденных и половозрелых крыс, развитии оксидативного стресса, а также, астроглиоза при хроническом облучении СВЧ 900 МГц формата GSM.

РЕГУЛЯЦИЯ ГЕМОДИНАМИКИ У ЖИВОТНЫХ РАЗНОГО ВОЗРАСТА

В ПОСТРАДИАЦИОННЫЙ ПЕРИОД

Сташкевич Д.Г., Наумов А.Д.

Государственное научное учреждение «Институт радиобиологии НАН Беларуси», Гомель, Беларусь.

stashkevich1@gmail.com Исследование функционального состояния сердечно-сосудистой системы (ССС) после облучения, в зависимости от возрастных факторов, представляет важную проблему современной радиобиологии, т.к. вышеотмеченные факторы ограничивают адаптационные возможности организма. По современным представлениям, пострадиационные изменения деятельности ССС тесно связаны с нарушениями в различных медиаторных системах, в частности, ренин-ангиотензиновой. Цель работы исследовать показатели регуляции системной гемодинамики у животных в возрасте 6-7 и 16-18 месяцев после облучения в дозе 1,0 Гр.

Изучали основные показатели центральной гемодинамики и экстракардиальной регуляции сердечного ритма; для блокады NO-синтазы использовали L-Name, после чего вызывали активацию ренин-ангиотензиновой системы раствором ангиотензина II. Животные были облучены в дозе 1,0 Гр на установке “ИГУР-1”. Исследования проводились на 10-е сутки после облучения.

Анализ экстракардиальной регуляции показал сдвиг вегетативного равновесия в сторону симпатической активности у животных, подвергнутых острому облучению в дозе 1,0 Гр, особенно это выражено у молодых животных. Облучение 6 мес. животных вызывало снижение скоростей сокращения и расслабления миокарда, снижение систолического выброса крови. У облученных животных в возрасте 16-18 мес. был выше показатель длительности сердечного цикла по отношению к контролю. Показатели гемодинамики у облученных животных в возрасте 6 мес. также существенно отличались от показателей 16-18 мес. животных.

Воздействие ионизирующего излучения приводило к активизации ренинангиотензиновой системы. У облученных молодых животных в ответ на введение ангиотензина II возрастали частота сердечных сокращений и скорость расслабления миокарда (СРМ), а в возрасте 16-18 мес. давление внутри левого желудочка сердца (ВЖД) и СРМ, по сравнению с соответствующим контролем.

Стимуляция ренин-ангиотензиновой системы после блокады синтеза NO у животных в возрасте 6 мес. приводила к повышению артериального давления (такое повышение составило 54,8 % в контроле и 59,6 % после облучении в дозе 1,0 Гр). Гипертензивный ответ после облучения и блокады синтеза NO был выше, чем после облучения, но без блокады синтеза NO. Активация ангиотензиновой системы животных в возрасте 16-18 мес. на фоне блокады синтеза NO вела к повышению системного артериального давления (58 % в контроле и 70 % после облучения). Также наблюдалось значимое отличие в показателях ВЖД, СРМ, причем изменения были разнонаправленные если значение ВЖД было больше в опытной группе, то СРМ в контроле. Роль NO-зависимых механизмов в ангиотензинергической регуляции гемодинамики в пострадиационный период снижается, особенно это выражено в группе животных в возрасте 16-18 мес.

ИЗБЫТОК НАСЫЩЕННЫХ ЖИРОВ В ДИЕТЕ МОЛОДЫХ КРЫС ВЫЗЫВАЕТ

ИЗМЕНЕНИЯ ЛИПИДНОГО СПЕКТРА, ХАРАКТЕРНЫЕ ДЛЯ СТАРЕНИЯ

Стороженко Г.В.

НИИ биологии Харьковского национального университета имени В.Н. Каразина, Харьков, Украина storojenko_g@rambler.ru Известно, что при старении возрастает оксидативное повреждение фосфолипидов и, в частности, митохондриального фосфолипида кардиолипина (КЛ), что приводит к увеличению проницаемости мембран митохондрий, подавлению их респираторной функции, и, как следствие, к гибели клеток. Снижение содержания КЛ коррелирует со снижением дыхательной активности митохондрий и наблюдается при старении, различных патологиях и апоптозе.

Ранее нами было показано, что пальмитиновая кислота значительно снижала содержание КЛ в гепатоцитах, приводила к накоплению его предшественника – фосфатидной кислоты (ФК) и подавляла жизнеспособность клеток. Учитывая, что жирные кислоты, поступающие в организм с диетой, могут включаться в липиды и оказывать влияние на их структурные и функциональные свойства, дальнейшим этапом нашей работы явилось изучение влияния пищевого рациона, обогащенного насыщенными жирными кислотами, на содержание липидов в различных тканях крыс. Исследования выполнены на 3и 24-месячных белых крысах-самцах линии Вистар. Контрольная группа животных содержалась на стандартном рационе вивария. Молодые животные экспериментальной группы, в дополнение к стандартному рациону, 6 недель получали говяжий жир.

Энергетическая ценность стандартного рациона составляла 146,52 ккал, а калорийность рациона экспериментальных животных была увеличена до 219,78 ккал. Установлено, что в старости происходит снижение содержания КЛ и повышение уровня ФК в печени, сердце и коре мозга по сравнению с молодыми крысами. Экспериментальная диета приводила к снижению содержания КЛ во всех изученных тканях молодых животных. Так, содержание КЛ при действии насыщенных жирных кислот диеты снижалось на (29,75±1,24) % в сердце и на (26,52±2,14) % в печени крыс, получавших говяжий жир (p0,05). Однако наиболее резкое снижение уровня КЛ наблюдалось в коре головного мозга экспериментальных животных и составляло (66,99±4,08) % от уровня контрольных животных (p0,05). В то же время, снижение уровня КЛ при действии насыщенных жирных кислот диеты сопровождалось накоплением ФК в изученных тканях. Так, относительное содержание ФК возрастало на (31,01±3,05) % в сердце, на (17,62±2,78) % в коре головного мозга и на (146,15±5,55) % в печени животных, получавших говяжий жир по сравнению с контрольными животными (p0,05). Известно, что ФК занимает центральное место в обмене фосфолипидов.

Увеличение массы ФК в клетке может являться результатом как усиления е синтеза de novo, так и подавлением е использования в синтезе фосфолипидов. Однако настоящими исследованиями показано, что в печени, сердце и коре мозга подопытных животных не происходит изменения содержания фосфатидилхолина, фосфатидилэтаноламина и общих фосфолипидов. Можно полагать, что накопление содержания ФК и снижение содержания КЛ на фоне отсутствия изменений остальных фосфолипидов в исследованных тканях подопытных животных, происходит вследствие подавления синтеза КЛ. Таким образом, эффекты обогащенной пальмитиновой кислотой диеты в тканях целого организма аналогичны действию пальмитиновой кислоты в культуре клеток, и приводят к снижению уровня КЛ, накоплению ФК в сердце, печени и коре мозга. В то же время, в тканях старых 24-месячных крыс наблюдаются аналогичные изменения содержания КЛ и ФК. Таким образом, полученные данные свидетельствуют о том, что насыщенные жирные кислоты диеты в тканях молодых крыс моделируют липидный состав клеток, характерный для старых животных.

ОСОБЕННОСТИ ОНТОГЕНЕЗА DROSOPHILA MЕLANOGASTER В СВЯЗИ

С ПРОЯВЛЕНИЕМ АДАПТИВНО ВАЖНЫХ ПРИЗНАКОВ И ФУНКЦИОНАЛЬНОЙ

АКТИВНОСТЬЮ ПОЛИТЕННЫХ ХРОМОСОМ

Страшнюк В.Ю.

НИИ биологии Харьковского национального университета имени В.Н. Каразина, г. Харьков, Украина vladimir.strashnyuk@mail.ru В последние годы наблюдается растущий интерес к изучению генетических эффектов политении как одного из эффективных механизмов усиления количественной экспрессии генов эукариот.

Целью исследования было изучить структурно-функциональные особенности политенных хромосом Drosophila melanogaster Meig. в связи с различиями по генотипу, действием факторов внешней среды, проявлением адаптивно важных признаков и продолжительностью различных стадий онтогенеза.

В результате исследований выявлена значительная генетическая вариабельность степени политении хромосом (СПХ) у линий и межлинейных гибридов D. melanogaster, что может обуславливать их дифференциальную жизнеспособность. Влияние генотипа проявляется в межлинейных различиях, действии инбридинга, гибридизации, отбора, изогенизации хромосом, пола и в различной степени индивидуальной изменчивости признака у разных генотипов.

СПХ в большой мере подвержена модифицирующим влияниям условий среды. В диапазоне температур 18 28 °С в слюнных железах 0-часовых предкуколок СПХ снижалась, в зависимости от генотипа, на 12,9 39,4 %. При этом темпы развития увеличивались примерно в 2,5 р. Угнетение эндоредупликации наблюдали в условиях личиночного перенаселения. Возрастание температуры сопровождалось измельчением мух, снижением теплоустойчивости, жизнеспособности, продолжительности жизни имаго.

Зависимые от температуры изменения СПХ противоположны изменениям пуфовой активности, которая возрастает с увеличением температуры. Модификации степени умножения генома в разных температурных условиях, по-видимому, представляют собой компенсационный механизм, посредством которого достигается необходимый уровень синтеза РНК в ядре при изменении скорости биохимических процессов.

Результаты исследований позволяют сделать вывод о том, что вариабельность степени политении хромосом является фактором дифференциальной приспособленности, и адаптации к условиям среды у дрозофилы.

ВПЛИВ МОНОХРОМАТИЧНОГО СВІТЛА НА РІЗНИХ ЕТАПАХ ОНТОГЕНЕЗУ

НА ПОКАЗНИКИ ПЛОДЮЧОСТІ DROSOPHILA

MELANOGASTER

Стрижельчик Н. Г.

НДІ біології Харківського національного університету імені В.Н. Каразіна, пл. Свободи, 4, 61022 Харків, Україна Ураження геному людини призводить до появи різноманітної патології. Причому, на різних етапах онтогенезу внесок різних пошкоджень у розвиток патологічних процесів може змінюватися. Численні дані літератури вказують на можливий негативний вплив на генетичний апарат еукаріот широко розповсюджених у медицині та побуті неіонізуючих видів випромінювання (мікрохвильового, лазерного, а також видимого світла різної довжини хвилі.

У зв’язку з цим, метою дослідження є вивчення впливу монохроматичного світла з різною довжиною хвилі на адаптивні можливості статевих клітин на різних етапах онтогенезу дрозофіли.

Дослідження проводили на Drosophila melanogaster лінії дикого типу Canton-S.

Оцінювали дію монохроматичного світла на яйця або імаго дрозофіли протягом 72 годин.

Джерелом світла були матриці Коробова. Аналізували рівень плодючості дрозофіли за кількістю лялечок та імаго.

Не виявлено зниження показників плодючості дрозофіли порівняно з контролем при впливі зеленого світла (565 нм) як на яйця, так і на імаго. Показники плодючості дрозофіли при впливі зеленого світла на яйця дрозофіли достовірно не відрізнялись від контролю та складали: за кількістю лялечок – 78,0 ± 4,2, за кількістю імаго – 73,2 ± 3,4 (t1 = 0,74; t2 = 1,18;

р 0,05), Показники плодючості дрозофіли при впливі зеленого світла на імаго також достовірно не відрізнялись від контролю і становили: за кількістю лялечок – 76,3 ± 2,9, за кількістю імаго – 71,7 ± 3,9 (t1 = 1,29; t2 = 1,37; р 0,05). При порівнянні показників плодючості дрозофіли, одержаних внаслідок впливу зеленого світла на різні етапи онтогенезу дрозофіли (яйця або імаго) не встановлено статистично значущої різниці поміж ними як за кількістю лялечок (t1 = 0,33; р 0,05), так і імаго (t2 = 0,26; р 0,05).

У проведених раніше дослідженнях не встановлено негативного впливу жовтого (590 нм) та червоного світла (650 нм) на показники плодючості дрозофіли. В той же час вплив синього світла (470 нм) призводив до достовірного зниження показників плодючості дрозофіли порівняно з контролем. При впливі на яйця: за кількістю лялечок до 76,9 % – (70,0 ± 4,0), за кількістю імаго до 74,9 % – (64,5 ± 3,9) (t1 = 2,53; t2 = 2,4; р 0,05). При впливі на імаго: за кількістю лялечок до 78,7 % – (71,7 ± 4,3), за кількістю імаго до 76,3 % – (65,7 ± 4,0) (t1 = 2,29; t2 = 2,26; р 0,05).

Отже, завдяки проведеним експериментальним дослідженням було підтверджено, що негативний вплив монохроматичного світла на адаптивні можливості статевих клітин дрозофіли залежить від довжини хвилі, а не від етапу онтогенезу на якому цей вплив відбувається. Зелене світло (565 нм) при дії на яйця або імаго дрозофіли не викликає достовірного зниження рівня показників плодючості дрозофіли за кількістю лялечок та імаго. Проте сине світло (470 нм) спричиняє достовірне зниження рівня показників плодючості як при впливі на яйця, так і імаго. Встановлена достовірна негативна кореляційна залежність ефекту від довжини хвилі монохроматичного світла.

УЛЬТРАСТРУКТУРНЫЕ ИЗМЕНЕНИЯ СТЕНКИ АОРТЫ ПРИ

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ САХАРНОМ ДИАБЕТЕ У ЖИВОТНЫХ РАЗНОГО

ВОЗРАСТА

Ступина А.С., Хаблак Г.В.

ГУ “Институт геронтологии имени Д.Ф. Чеботарева НАМН Украины” Киев, Украина, morphology@geront.kiev.ua Целью работы является изучение возрастных особенностей ультраструктурных изменений стенки аорты на ранних стадиях развития экспериментального сахарного диабета (СД).

Использованы две модели СД: 1) у крыс линии Вистар (8 и 27 мес.) СД вызывался одноразовым внутрибрюшинным введением стрептозотоцина (СТЦ); 2) у мышей линии C57B1/6 (8 и 30 мес.) – ежедневным внутрибрюшинным введением СТЦ в течение 5-ти суток. Гистохимически определяли гликоген, гликозаминогликаны (ГАГ), белки (по МакМанусу, Шабадашу, Гайденгайну).

Гистологическое и электронномикроскопическое изучение органов взрослых и старых животных свидетельствовало об адекватности модели СД. В стенке аорты при диабете значительные изменения происходили только в участках, подверженных гемодинамическим нагрузкам (бифуркация аорты, отхождение сосудов) и проявлялись отеком цитоплазмы эндотелиальных клеток (ЭК), разрушением органелл. У взрослых животных при этом не нарушалась непрерывность эндотелиальной выстилки, не наблюдался некроз эндотелиоцитов. У старых животных выражена деструкция органелл и мембран ЭК, наблюдался кариопикноз и кариорексис, сопровождающийся десквамацией ЭК. При этом формировались пристеночные конгломераты фибрина с единичными тромбоцитами и эритроцитами, а также очаги плазморрагии в субэндотелии. В гладкомышечных клетках (ГМК), непосредственно прилежащих к внутренней эластической мембране, соответственно участкам повреждения ЭК, отмечались перестройки, свидетельствующие об усилении секреторной и пластической функций. Здесь между ГМК происходило накопление межуточного вещества, ГАГ и волокон коллагена. У контрольных старых животных отмечены возрастные особенности изменения исследуемых показателей.

Выводы. При моделировании СД начальные ультраструктурные изменения развивались в участках аорты, испытывающих гемодинамические нагрузки. У взрослых животных не наблюдалось нарушение непрерывности эндотелиальный выстилки. У старых – изменения ЭК были более выражены, сопровождаясь гибелью ЭК и формированием пристеночных тромбов.

ВОЗРАСТНЫЕ ОСОБЕННОСТИ АСТРОГЛИАЛЬНОГО ОТВЕТА НА

ИНТОКСИКАЦИЮ ИОНАМИ АЛЮМИНИЯ

Сухаренко Е.В.1, Кириченко С.В.2 Днепропетровский национальный университет имени О. Гончара, Украина Керченский государственный морской технологический университет, Керчь, Украина helenasuhar@gmail,com Интенсивное развитие современных технологий является основной причиной загрязнения окружающей среды. Большое число поллютантов обладает нейротоксическими эффектами. Воздействие различных ионов металов вызывает многофакториальные и неоднозначные изменения в зрелой и развивающееся нервной системе. В последние годы широко изучается индуцируемые ионами алюминия нейродегенеративные изменения в ЦНС зрелого организма. В тоже время, эффекты алюминия на развивающийся мозг остаются неизученными.

Тканеспецифические белки являются ключевыми, жизненно необходимыми макромолекулами для стабильного функционирования всех позвоночных. Именно эти белки необычайно чувствительны к воздействию неблагоприятных факторов.

Астроциты являются главным гистотипом, который обеспечивает питание и выживание нейронов. Глиальный фибриллярный кислый белок (ГФКБ) – основной компонент цитоскелета астроцитов и специфический маркер, изменения экспрессии которого, отражают патогенетические нарушения нервной системы.

Целью работы была оценка прогностического значения молекулярного цитоскелетного маркера ГФКБ в мозге мальков (4-6 мес.) и половозрелых особей (2-3 года) бычка-песочника (Neogobius fluviatilis) в условиях повышенной концентрации ионов алюминия (50 мкг/мл) в течение 35 дней. Интенсивность астроглиоза оценивали по содержанию ГФКБ в мозге особей экспериментальных и контрольных групп.

В мозге мальков экспериментальной группы выявлено значительное увеличение астроглиальной реактивации по сравнению с экспериментальной группой взрослых особей.

Достоверное повышение содержания ГФКБ было отмечено на 92 % и 49 % по сравнению с соответствующими группами контроля. Определение массы особей также показало достоверное отставание в развитии мальков в среднем на 18 %. Отличия в средней массе контрольной и экспериментальной групп половозрелых особей не выявлены.

Более интенсивная астроглиальная реактивность в развивающемся мозге может быть связана с тем, что с возрастом пролиферативная и метаболическая активность глиальных клеток прогрессивно снижается. Полученные результаты показали дифференциальную астроглиальную реакцию на интоксикацию ионами алюминия, что может быть причиной нарушений процессов развития.

КОРРЕКЦИЯ МЕЛИПРАМИНОМ СОДЕРЖАНИЯ СФИНГОЛИПИДОВ

В СКЕЛЕТНОЙ МУСКУЛАТУРЕ СТАРЫХ КРЫС

Тимофийчук О.А.

НИИ биологии Харьковского национального университета имени В.Н. Каразина, пл. Свободы, 4, 61022 Харьков, Украина olga.timofijchuk@gmail.com Сфинголипиды (СФЛ) – компоненты плазматических мембран эукариотических клеток, кроме того, они являются предшественниками активных метаболитов. Критическая роль в регуляции клеточных процессов через сигнальный сфингомиелиновый (СФМ) путь принадлежит именно церамиду, который, ингибирует вызванную инсулином транслокацию протеинкиназы В (ПКВ) в мембраны, подавляет активность фосфолипазы Д (ФЛД). Таким образом, церамид приводит к нарушениям в звеньях сигналинга инсулина, необходимых для регуляции стимулированного гормоном поглощения и метаболизма глюкозы в скелетной мускулатуре (СМ). Рядом исследований установлено существенное увеличение базального уровня церамидов на фоне снижения массы СФМ в СМ как в старости, так и при ряде возраст-ассоциированных патологических состояний (инсулинорезистентность, сахарный диабет 2 типа). Было показано, что основная масса церамида в клетке образуется в результате активации кислой сфингомиелиназы (СФМазы), активность которой повышается в процессе физиологического старения. В последние годы также установлено, что трициклический антидепрессант, мелипрамин, является ингибитором кислой СФМазы.

Однако на данный момент не установлено действия мелипрамина на метаболизм СФЛ в СМ.

В виду этого целью данного исследования было изучение возможности коррекции мелипрамином содержания СФЛ в различных морфофункциональных типах СМ в старости.

Работа выполнена на интактных 3-х и 24-месячных самцах крыс линии Вистар.

Мелипрамин вводили внутримышечно в дозировке 10 мг на кг массы животного 14 дней.

Животных наркотизировали диэтиловым эфиром. Из брюшной полости извлекали диафрагму, с задних конечностей икроножную и камбаловидную мышцы. Липиды экстрагировали из тканей по методу Bligh и Dyer, разделяли на фракции с помощью тонкослойной хроматографии.

В результате проведенных исследований было показано, что на стадии позднего постнатального онтогенеза в изученных нами типах СМ наблюдаются альтерации в обмене СФЛ, которые выражаются в снижении уровня СФМ и значительном повышении содержания церамида.

Причем наиболее выраженное накопление церамида и снижение доли СФМ было отмечено в диафрагме (33 и 70 %, соответственно) 24-месячных животных в сравнении с молодыми крысами. Установленное нами накопление церамида может быть обусловлено как его синтезом de novo при участии церамидсинтазы, так и гидролизом мембранных СФМ СФМазами, среди которых наиболее важное место занимает кислая СФМаза. Снижение массы СФМ в СМ, в свою очередь, может происходить как за счет снижения интенсивности синтеза липида de novo, так и за счет усиления его деградации под действием кислых СФМаз, активность которых существенно возрастает в старости в различных типах клеток. Для выяснения механизма обмена СФЛ в тканях СМ в старости 24месячные животные получали мелипрамин, ингибитор кислой СФМазы. Введение мелипрамина старым крысам in vivo индуцировало повышение уровня СФМ и снижение доли церамида до уровня молодых животных как в диафрагме, так и в изученных мышцах задних конечностей. Наибольший эффект мелипрамина наблюдался в диафрагме и камбаловидной мышце, где содержание СФМ повысилось на 137 и 136 %, соответственно, а содержание церамида снизилось на 51 % в сравнении с животными контрольной группы.

Таким образом, введение мелипрамина обуславливает повышение содержания СФМ на фоне относительного снижения уровня церамида, что может свидетельствовать об эффективной блокаде кислой СФМазы мелипрамином в тканях СМ. Последнее позволяет предположить, что возрастные альтерации метаболизма СФЛ и, связанный со старением, ряд патологических состояний организма являются обратимыми.

АНГИОСТАТИНЫ: ГЕНЕРАЦИЯ И РОЛЬ В НОРМЕ И ПАТОЛОГИЯХ,

АССОЦИИРОВАННЫХ СО СТАРЕНИЕМ

Тихомиров А.А., Юсова Е.И., Жерносеков Д.Д., Диордиева С.И., Рока-Мойа Я.М., Гриненко Т.В.

Институт биохимии имени А.В. Палладина НАН Украины, г. Киев, Украина artem_tykhomyrov@ukr.net Ангиогенез – процесс образования новых кровеносных сосудов. В норме во взрослом организме процессы ангиогенеза протекают с низкой интенсивностью благодаря поддержке баланса между про- и антиангиогенными факторами и активируются только при регенеративных процессах. Нарушения регуляции новообразования сосудов и связанный с этим патологический ангиогенез показаны при возрастных изменениях в тканях, онкологических процессах, атеросклерозе, диабете, язвенной болезни, некоторых аутоиммунных заболеваниях, болезни Альцгеймера, ряде патологий развития.

Неоваскуляризация играет значительную роль в развитии опухолей и метастазировании (Folkman, 1971). Среди множества физиологических ингибиторов ангиогенеза особую роль играют фрагменты различных крингл-содержащих белков: плазминогена, урокиназы, фактора роста гепатоцитов (HGF). Протеолитические фрагменты белка-гликопротеина плазминогена, содержащие различное количество его крингловых доменов, считаются одними из самых мощных супрессоров ангиогенеза и получили название ангиостатинов – АС (O'Reilly, 1994). Наиболее интенсивно АС генерируются клетками первичной опухоли вследствие нарушения регуляции активности целого ряда протеиназ и могут быть маркерами опухолевого роста. АС эффективно подавляют пролиферативную активность и миграцию эндотелиоцитов, запускают процессы их апоптоза, предотвращая образование новых кровеносных сосудов и сдерживая, тем самым, развитие метастазов. АС вовлекаются не только в процессы, связанные с онкогенезом, но также модулируют ангиогенез при других нарушениях, сопровождающихся активацией воспалительных реакций, в частности, при диабете. Роль АС при развитии диабет-ассоциированных ангиопатий сложна и неоднозначна.

Обсуждается вовлечение АС в развитие таких диабетических осложнений, как ишемическая болезнь сердца и ретинопатия.

Предлагается и обосновывается использование иммунохимических методов для анализа качественных и количественных изменений спектров АС в онтогенезе и патологиях.

ВЛИЯНИЕ БЛОКАТОРА ОПИОИДНЫХ РЕЦЕПТОРОВ НАЛТРЕКСОНА

НА ИЗМЕНЕНИЯ РЕАКТИВНОСТИ ИЗОЛИРОВАННОЙ СОСУДИСТОЙ

ПОЛОСКИ, ВЫЗВАННЫЕ БАКТЕРИАЛЬНЫМ ЛИПОПОЛИСАХАРИДОМ,

У ВЗРОСЛЫХ И СТАРЫХ МЫШЕЙ

Тушинская Т., Дубилей Т.

ГУ «Институт геронтологии имени Д. Ф. Чеботарева НАМН Украины», Киев, Украина tattush@geront.kiev.ua Известно, что введение опиоидных антагонистов ослабляет нарушения гемодинамики, возникающие при эндотоксическом шоке. Полагают, что этот системный эффект обусловлен блокадой действия эндогенных опиоидов. В последнее время появились сообщения о том, что блокаторы опиоидных рецепторов могут непосредственно влиять на состояние TLR4-рецепторов в клетках иммунной системы. Для сосудистой стенки возможность подобного взаимодействия до настоящего времени не исследовалась. Целью настоящей работы было изучить влияние блокатора µ-опиоидных рецепторов налтрексона на вызванные липополисахаридом (ЛПС) E. coli изменения реактивности изолированной сосудистой полоски у мышей разного возраста.

Опыты были проведены на изолированных кольцевых фрагментах грудного отдела аорты взрослых (2 мес.) и старых (24 мес.) самцов мышей линии СВА. Оценивали амплитуду -агонистзависимых сократительных реакций (фенилэфрин, 10 -6) и эндотелийзависимых дилататорных реакций (ацетилхолин, 10-6 ) до и после аппликации ЛПС (10 мкг/мл) либо ЛПС на фоне налтрексона (10-4). Регистрацию проводили в изометрическом режиме в присутствии ингибитора циклооксигеназы индометацина (10-6).

ЛПС оказывал дилататорное влияние на предсокращенные фенилэфрином кольцевые фрагменты аорты, одинаково выраженное в обеих возрастных группах мышей. После прекращения действия ЛПС у взрослых мышей амплитуда констрикторной реакции на фенилэфрин увеличивалась, а дилататорной реакции на ацетилхолин не изменялась. У старых мышей после воздействия ЛПС амплитуда констрикторной реакции на фенилэфрин увеличивалась более выражено, чем у взрослых, а дилататорный ответ на ацетилхолин снижался. Добавление налтрексона сопровождалось усилением фенилэфриновой контрактуры, более выраженным в младшей возрастной группе. Как у взрослых, так и у старых животных амплитуда вызываемого ЛПС расслабления на фоне налтрексона существенно не изменялась, однако возникающие после воздействия ЛПС изменения сосудодвигательных реакций ослабевали. Полученные результаты свидетельствуют о том, что в условиях in vitro предварительная блокада опиоидных рецепторов не повлияла на изменения реактивности сосудистой стенки, вызванные действием ЛПС, но ослабила проявления последействия эндотоксина.

«НЕГАТИВНОЕ» СТАРЕНИЕ НА ЧТО ОНО УКАЗЫВАЕТ?

Халявкин А.В.

Институт биохимической физики РАН, Институт системного анализа РАН Москва, Россия, ab3711@mail.sitek.net Особи большинства видов, исследуемых в стандартных условиях, проявляют признаки обычного старения. Это физиологическое увядание, снижение общей резистентности, плодовитости и т.п. Но у некоторых рыб, рептилий и др., напротив, наблюдается возрастное увеличение плодовитости и резистентности, приводящее к снижению темпа смертности с возрастом и росту средней продолжительности предстоящей жизни при увеличении возраста. Феномен был назван негативным старением [Vaupel et al., 2004]. Парадоксальное негативное старение, наряду с доказательствами того, что все компоненты организма способны к полному самообновлению, помогает ответить на вопрос, как возникает старение.

Ведь именно при отклонениях от режимов адекватного функционирования, диктуемых внешней средой, даже потенциально нестареющие организмы такие как амебы и гидры начинают стареть «по Гомперцу», т. е. с ростом темпа смертности по экспоненте. Реакцию особи на изменение внешних условий характеризует сдвиг отображающей точки управляющих систем организма в новое состояние, адекватное этим условиям.

Стабилизирующие блоки должны обеспечивать поддержание нового состояния параметров управляющей системы. Для возникновения признаков старения даже у потенциально нестареющего организма необходимо и достаточно, чтобы рабочая область фазового пространства состояний отображающей точки была бы шире фазового пространства ее стабильных состояний. Тогда возможны ситуации, при которых положение отображающей точки, соответствующее внешним условиям, оказывается в зоне нестабильности своего поддержания. Это повлечет за собой дисбаланс между запросом среды и реакцией организма, неадекватно влияя на координирующие и коррекционные функции управляющих систем организма, приводя к «системному расхождению», характерному для старения, темп которого будет пропорциональным степени отклонения отображающей точки от границ устойчивых режимов. Причем формально возможны системы управления, знак дисбаланса которых в неустойчивом режиме может быть разным как отрицательным (большинство видов с привычным для нас старением), так и положительным (виды с негативным старением).

ВОЗРАСТНЫЕ ИЗМЕНЕНИЯ ВНУТРИТКАНЕВЫХ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК –

ПРИЧИНА, ИЛИ СЛЕДСТВИЕ СТАРЕНИЯ ОРГАНИЗМА?

Халявкин А.В.

Институт биохимической физики РАН, Институт системного анализа РАН Москва, Россия, ab3711@mail.sitek.net Гипотеза роли первичного старения стволовых клеток в возрастном замедлении восстановления тканей находит все больше сторонников. В связи с этим уместно рассмотреть самообновление ткани на примере эпидермиса, стволовые клетки которого локализованы только в базальном слое. Поверхностью эпидермиса является роговой слой конечный продукт дифференцировки эпителия кожи. В процессе жизнедеятельности клетки верхних рядов рогового слоя слущиваются и постоянно замещаются созревшими клетками нижних дифференцирующихся слоев. Те, в свою очередь, замещаются клетками базального слоя, уходящими в дифференцировку. Восполнение популяции базальных клеток происходит за счет их пролиферации. На основании интерпретации результатов экспериментов по клоногенности базалоцитов после облучения, их чувствительности к G1кейлонам и др. уже несколько десятилетий назад была выдвинута концепция, согласно которой только ~10 % базальных клеток являются истинно стволовыми. Остальные базалоциты, названные переходными амплифицирующимися клетками, являются их потомками, коммитированными к дифференцировке. До недавнего времени эта концепция считалась общепринятой [J. Invest. Dermatol. 2002, v.119, p.888; Nat. Biotechnol. 2004, v. 22, p. 411]. Однако еще 30 лет назад, проанализировав данные, лежащие в основе этой концепции, и рассмотрев особенности эпидермального гомеостаза в норме и в патологии, мы пришли к выводу, что базалоциты представляют собой единый клеточный тип. А их гетерогенность по некоторым свойствам связана не со вступлением части из них на путь дифференцировки, а с их нахождением или в митотическом цикле, или вне его [Изв. АН СССР, сер. биол. 1982, №1, с. 156 и №5, с. 778]. Недавно этот вывод был подкреплен экспериментально [Nature 2007, v. 446, p. 185; Cell Stem Cell 2007, v. 1, p. 371], что позволяет рассматривать все эпидермоциты базального слоя в качестве стволовых клеток.

Известно, что стволовые клетки не ограничены лимитом Хейфлика. Поэтому снижение активности клеток базального слоя, приводящее к истончению и частичному паракератозу эпидермиса при старении, связано не с исчерпанием лимита клеточных делений, а с центральными механизмами регуляции и управления в организме, находящимся вне состояния динамической устойчивости. Это приводит к регуляторному снижению активности стволовых клеток и замедлению самообновления тканей, влекущему за собой старение организма. Однако старение самих стволовых клеток оказалось обратимым. Это показано как in vitro, так и in vivo.

ФОСФОЛИПАЗА Д-ЗАВИСИМЫЙ СИГНАЛИНГ ИНСУЛИНА В НЕОКОРТЕКСЕ

КРЫС. ВОЗРАСТНЫЕ И ИНДУЦИРОВАННЫЕ ИЗМЕНЕНИЯ

Харченко В.С.

НИИ биологии Харьковского национального университета имени В.Н. Каразина, пл. Свободы, 4, 61022 Харьков, Украина Накопление церамида (ЦМ) в нервных клетках, индукция оксидативного стресса, образование -амилоида, гиперфосфорилирование белка tau и снижение активности фосфолипазы Д (ФЛД) предшествуют развитию инсулинорезистентности мозга и возрастным нейродегенеративным изменениям. На сегодняшний день данные об участии ФЛД в сигнальных путях активируемых инсулином в мозгу и изменениях активности ФЛД, которые происходят в процессе старения, немногочисленны и противоречивы. Поэтому целью работы стало изучение возрастных особенностей ФЛД-зависимого звена передачи сигнала инсулина в неокортексе крыс и выяснение роли церамида в возрастных и индуцированных изменениях этого процесса. Исследования проводили на неокортексе 3-х и 24-месячных крыс самцов. Ткань инкубировали в Кребс-Рингер бикарбонатном буфере с 0,1 % альбумином 3 часа при 37 °С в присутствии С2-ЦМ (5 мкг/мл среды инкубации) или пальмитиновой кислотой (16:0) (0,75 мМ) или без них. Для определения содержания фосфатидилэтанола (ФЭТ) ткань неокортекса преинкубировали 10 минут с 300 мМ этанолом, затем в среду инкубации вносили инсулин (100 нМ) или 0,9 % NaCl (в качестве контроля к инсулину) и через 5 или 30 минут останавливали реакцию. Липиды разделяли с помощью тонкослойной хроматографии. Установлено, что при инкубации неокортекса 3-х месячных крыс с инсулином повышается содержание ФЭТ на 34 % на 5-й минуте инкубации и на 78 % на 30-й минуте, и снижается содержание фосфатидилхолина (ФХ) на 38 % на 5-й минуте действия гормона и на 46 % после 30-ти минут инкубации с инсулином. Указанные изменения содержания липидов свидетельствуют об активации инсулином ФХ-специфичной ФЛД у молодых животных в этот промежуток времени. В то же время, обнаружено повышение базального уровня ЦМ после инкубации с С2-ЦМ или 16:0 в неокортексе молодых крыс, а также в неокортексе 24-месячных крыс. Кроме того, инсулин не вызывал повышения содержания ФЭТ в этих клетках.

Таким образом, установлено, что в неокортексе 3-х месячных крыс инсулин стимулирует ФЛД. В то же время, в коре мозга 24-месячных крыс, а также при добавлении в среду инкубации неокортекса экзогенного С2-ЦМ или его предшественника – 16:0 происходит накопление ЦМ и отмена инсулинстимулированного образования ФЭТ в неокортексе молодых крыс. Обнаруженные в настоящей работе возрастные и экспериментально индуцированные нарушения регуляции инсулином ФЛД могут быть связаны с накоплением в ткани неокортекса ЦМ. ФЛД участвует в пролиферации нервных клеток, экзо- и эндоцитозе, в формировании аксонов и образовании ацетилхолина. Учитывая эти данные и результаты настоящей работы можно полагать, что подавление инсулинзависимой активности ФЛД ЦМ в старости может приводить к значительным нарушениям функционирования мозга.

ИЗУЧЕНИЕ ЗАЩИТНОГО ДЕЙСТВИЯ МЕЛАТОНИНА НА МОДЕЛИ

ИНДУЦИРОВАННОГО ФИБРОЗА ПЕЧЕНИ: ОЦЕНКА ГИСТОЛОГИЧЕСКОЙ

КАРТИНЫ

Чернышева М.Б. 1, Василегина Ю.И. 1, Налобин Д.С. 1, Клюс К.А. 1, Невредимова Т.С. 2, Мармий Н.В. 1, Супруненко Е.А. 1, Беспятых А.Ю. 1, Есипов Д.С. 1 Московский государственный университет имени М.В. Ломоносова, Московский государственный университет тонких химических технологий имени М.В. Ломоносова, г. Москва, Россия mbch@list.ru Модель индуцированного фиброза печени позволяет исследовать процессы, приводящие к возникновению и прогрессированию ряда заболеваний печени. Одним из веществ, обладающих гепатотоксическим эффектом, является CCl4. Возникающие в процессе распада CCl4 свободные радикалы, индуцируют окислительный стресс, который приводит к гибели гепатоцитов. Для снижения уровня окислительного стресса можно использовать различные антиоксиданты.

В данной работе было исследовано влияние непрямого антиоксиданта гормона мелатонина на развитие фиброза печени мыши. В эксперименте использовали мышей () линии С57Bl/CBA. Все животные были разбиты на 4 группы: интактный контроль; опытная группа индуцированный фиброз; группа «масляный» контроль; группа индуцированный фиброз и мелатонин. В каждой экспериментальной группе количество животных соответствовало 3 особям на каждую экспериментальную точку. CCl 4 вводили в/б дважды в неделю: 1 мкл/г в виде 30 % масляного раствора. Мыши соответствующей экспериментальной группы получали мелатонин с питьевой водой в концентрации 20 мкл/г в течение всего опыта (4 недели). Забор и фиксацию гистологического материала проводили после 1, 2, 3 и 4-й недели от начала инъекций. Дальнейшую обработку материала проводили по стандартной методике. Получали срезы толщиной 6 мкм, окраску проводили по методу Маллори. Степень развития фиброза оценивали по шкале METAVIR.

Было обнаружено, что уже после 1-й недели эксперимента в области портальных трактов начинает откладываться экстрацеллюлярный матрикс, далее образуются септы (2-3 недели), которые прободают паренхиму органа и образуют соединительнотканные тяжи вокруг каждой дольки, также были отмечены очаги некроза (4-я неделя). В группе, которая получала с питьевой водой мелатонин, степень фибротических изменений была значительно снижена.

На основании полученных данных можно сделать вывод о гепатопротекторных свойствах мелатонина при остром токсическом повреждении печени.

ВЛИЯНИЕ ВОЗРАСТА САМЦОВ И САМОК ДРОЗОФИЛЫ

НА ЧИСЛО ПОТОМКОВ

Чешко Т.М., Шкорбатов Ю.Г.

НИИ биологии Харьковского национального университета имени В.Н. Каразина, пл. Свободы, 4, 61022 Харьков, Украина, Yury.G.Shckorbatov@univer.kharkov.ua Вопрос о влиянии возраста родителей на жизнеспособность потомства имеет большое теоретическое и практическое значение. В нашей предыдущей публикации в материалах IX симпозиума «Биологические механизмы старения» [Чешко Т.М., Шкорбатов Ю.Г., 2010] мы проанализировали влияние возраста одного из родителей на число потомков одной пары дрозофил. Исследовали плодовитость в зависимости от возраста одно из родителей (самца или самки), в то время, как второй родитель, участвующий в эксперименте, был возрасте 1 сут. (12-14 часов). Стареющих особей подсаживали в пробирку в возрасте 6, 10, 14, 18 суток, ко второму родителю в возрасте 1 сут. После составления пары обе особи оставались в пробирке до конца эксперимента. В этой работе было показано, что у самок в возрасте 6 – 18 суток количество потомков снижено. При анализе количества потомства стареющих самцов было показано снижение количества потомков у 6-суточных самцов, у 10-суточных самцов наблюдалось повышение количества потомков выше уровня контроля. Потомство 14суточных самцов примерно соответствовало уровню контроля. В потомстве 10- и 14суточных самцов была обнаружена тенденция к превышению количества самцов над самками. В возрасте 18 суток количество потомков вновь снижалось ниже уровня контроля.

В последующем исследовании, результаты которого приведены в данных тезисах, дрозофил (Drosophila melanogaser L.). инбредной линии Canton-S со степенью инбридинга 100-120 культивировали в пробирках диаметром 2,5 см и высотой 10 см., как и в предыдущем эксперименте стареющих особей подсаживали в пробирку в возрасте 6, 10, 14 или 18 суток, однако родителей разного возраста оставляли в пробирке для культивации на 2 суток, после чего удаляли из пробирки. Таким образом, анализировали потомство, развившееся из яиц, отложенных в период двух суток, что позволило исключить эффекты различной продолжительности жизни родителей на число потомков. Кроме того, было проанализировано влияние возраста родителей на количество потомков пары мух во втором поколении (F2). Было показано, что в первом поколении увеличение возраста самок до 6-18 суток значительно уменьшало число потомков, причем уровень плодовитости не зависел от возраста самки. В первом поколении самцов различного возраста плодовитость была значительно снижена у самцов 6-суточного возраста, в возрасте самца 10 суток плодовитость пары мух несколько превышала уровень контроля, особенно по количеству в потомстве самцов, а в возрасте 14 и 18 суток сохранялась на уровне контроля. Во втором поколении самок разного возраста не наблюдалось изменения плодовитости потомков. Во втором поколении самцов разного возраста наблюдалось достоверное повышение числа потомков 14-суточных самцов. По нашему мнению, наблюдаемые различия в эффектах возраста родителя на плодовитость могут быть связаны как с отбором на уровне организма (самцы – «долгожители» отличаются большей жизнеспособностью по различным показателям), так и с отбором на уровне сперматозоидов, позволяющим снизить негативное влияние возраста на плодовитость.

ИНСУЛИНОРЕЗИСТЕНТНОСТЬ, УСКОРЕННОЕ СТАРЕНИЕ

И СЕРДЕЧНО-СОСУДИСТАЯ ПАТОЛОГИЯ

Шатило В. Б., Ищук В. А.

ГУ “Институт геронтологии имени Д.Ф. Чеботарева НАМН Украины”, Киев, Украина, vshatilo@ukr.net, vadishchuk@ukr.net С возрастом увеличивается частота встречаемости инсулинорезистентности (ИР), которой принадлежит важная роль в развитии сердечно-сосудистых заболеваний, сахарного диабета 2-го типа, ожирения и злокачественных новообразований, приводящих к ускоренному старению и преждевременной смерти.

Цель. Изучить влияние ИР на функциональный возраст (ФВ) и степень постарения организма.

Методы. Обследованы 31 чел. среднего (40-59 лет) и 35 чел. пожилого возраста (60-75 лет). В исследование не включали больных с эндокринной патологией и декомпенсированными заболеваниями внутренних органов. Определяли концентрацию в глюкозы и инсулина в плазме, рассчитывали индекс инсулинорезистентности HOMA, при его значении выше 2,77 констатировали ИР. Функциональный возраст ССС определяли по разработанной нами формуле, в которой использовали показатели мощности субмаксимальной физической нагрузки и индекса массы тела.

Результаты. У здоровых людей без ИР индекс НОМА не отличался у лиц среднего (1,54±0,41) у. е. и пожилого возраста (1,32±0,25) у. е. У людей среднего и пожилого возраста без ИР разница между ФВ и календарным возрастом (КВ) составила (0,5±4,6) и (-0,1±2,6) лет, соответственно, что свидетельствует о физиологическом старении организма.

При наличии ИР у большинства обследованных выявлена патология ССС (у 55 % людей среднего и 65 % пожилого возраста). У лиц с ИР среднего возраста разница между ФВ и КВ составила (15,2±3,4) года, у пожилых (9,9±2,4) года. При проведении корреляционного анализа установлена прямая связь между ФВ и степенью постарения, с одной стороны (r=0,77, р0,05), и между степенью постарения и индексом НОМА, с другой (r=0,45, р0,05).

Выводы. У людей среднего и пожилого возраста ИР является эндогенным фактором развития ускоренного старения и формирования сердечно-сосудистой патологии. При наличии инсулинорезистентности ФВ и степень постарения организма выше у людей среднего возраста.

СПОСОБНОСТЬ К ОБУЧЕНИЮ КРЫС, ДЛИТЕЛЬНО НАХОДЯЩИХСЯ

НА КАЛОРИЙНО ОГРАНИЧЕННОЙ ДИЕТЕ

Шахова Е.Г., Красникова О.В.

НИИ биологии ХНУ имени В.Н. Каразина, г. Харьков, Украина olena.shakhova@yandex.ua В старческом возрасте наблюдается снижение когнитивных функций у человека и животных. Однако отмечается широкая вариабельность выполнения когнитивных тестов среди старых животных одного возраста: выделяют как животных с отсутствием возрастных изменений когнитивных функций, так и животных с различной степенью их нарушения.

Полагают, что такая гетерогенность данных во многом связана с проявлением индивидуальных типологических свойств нервной системы животных, основой которых являются врожденные особенности метаболизма и нейрогуморальной регуляции.

В работе изучали возрастные и индивидуальные особенности способности к обучению у контрольных крыс и у животных, длительно содержащихся на калорийно ограниченной диете (КОД), которая способствует значительному увеличению продолжительности их жизни.

Животных, начиная с одномесячного возраста, переводили на КОД (диета C. M.

МcCay в модификации В. В. Никитина), и содержали на этой диете пожизненно.

Способность к обучению изучали в процессе выработки условного рефлекса активного избегания (УРАИ) электроболевого раздражения в челночной камере по методике Я. Буреша.

Регистрировали количество условнорефлекторных реакций активного избегания, реакций избавления и латентные периоды реакций избавления.

В процессе выработки УРАИ было установлено замедление скорости формирования и воспроизведения навыков активного избегания у старых 24-25-ти месячных животных по сравнению с молодыми 3-месячными крысами как в контрольной группе, так и, особенно, под действием КОД. Перевод животных на КОД способствовал улучшению по сравнению с контролем некоторых показателей формирования и воспроизведения навыков в памяти 3месячных крыс, в то время как длительное ограничение калорийности рациона приводило к торможению процесса обучения старых 24-25-ти месячных животных, но существенно не влияло на процессы сохранения информации в их долгосрочной памяти.

По характеру обучения всех животных, независимо от возраста и условий содержания, можно разделить на 3 группы: обучающиеся по экспонентному типу (ЭТ), по инсайтному типу (ИТ), и «отказывающиеся» от обучения (ОТ), что соответствует данным литературы. У животных этих типов наблюдали различную представленность активных и пассивных психоэмоциональных проявлений в поведении на этапе распознавания условий задачи и реализации навыков, в основе чего лежит различное соотношение силы, подвижности и уравновешенности процессов возбуждения и торможения.

Анализ возрастной динамики соотношения животных с разными типами обучения показал, что у одномесячных животных 50 % особей демонстрируют ЭТ обучения, 33 % ИТ и 17 % животных ОТ. У контрольных животных это соотношение практически не изменяется с возрастом от одного до 24-25-ти месяцев, в то время как длительное содержание на КОД сопровождается снижением в 24-25 месяцев доли животных с ЭТ обучения в сравнении с контрольными животными такого же возраста. Снижение доли животных с ЭТ обучения, для которых характерно преобладание активных проявлений поведения над пассивными, повышенная возбудимость и высокая двигательная активность, может быть следствием проявления «энергосберегающей» стратегии в результате снижения поступления калорий в организм. Учитывая то, что типы обучения являются отражением врожденных особенностей нервной системы, можно полагать, что КОД, снижая долю животных с ЭТ обучения, является одним из немногих инструментов, способных модулировать поведенческие проявления индивидуальных типологических свойств нервной системы.

В целом можно полагать, что установленные в данной работе изменения поведенческих реакций и когнитивных функций животных под действием КОД по сравнению с контрольными животными являются результатом длительных и сложных процессов адаптации животных к действию хронического метаболического стресса, который вызван значительным ограничением калорийности рациона.

ВІКОВІ ОСОБЛИВОСТI ПОВЕДIНКИ ЩУРIВ ЛIНIЇ ВIСТАР У ТЕСТI

“ВIДКРИТОГО ПОЛЯ” Шеверьова В.М.

НДІ бiологiї Харкiвського нацiонального унiверситету iмені В.Н. Каразiна, пл. Свободи, 4, 61022 Харкiв, Україна Відомо, що зміни в емоцiйно-вольовiй сфері значною мірою можуть позначатися на виборі стратегії поведінки в незвичній ситуації. З огляду на те, що тест “вiдкритого поля” (ВП) є стресовим подразником для щурiв та дозволяє виявити їх індивідуальну реакцію на аверсивні умови відкритого простору, в роботi дослiджували особливостi поведiнки тварин у ВП в рiзнi перiоди онтогенезу. Експерименти виконанi на щурах-самцях 3 міс. (n=37) та 24 мiс. (n=30) віку (лінія Вістар). Тестування у ВП проводили за стандартною методикою у вiдносно звукоiзольованiй камері у весняно-лiтнiй перiод у ранковi години. Тривалiсть тестперiоду 5 хв. Дослiджували горизонтальну та вертикальну рухову активність (за числом перетнутих квадратів і стійок), “емоційність” (за числом дефекацій і уринацій), латентний період (ЛП) виходу з центру “поля”, грумiнг, число виходів у центр “поля”. Через 30 хв.

після завершення періоду тестування у камерi з електрифiкованою пiдлогою реєстрували пороги реакцій тварин на електрошкірне больове подразнення Показано, що у 24 міс. щурiв порiвняно з 3 мiс. у ВП істотно знижувалися майже всі показники рухової активності (горизонтальної, вертикальної, стiйки з опорою на стiнку). Число виходiв у центр “поля” і стійок без опори на стінку зменшувалося (на 55 % і 61 % відповідно) на тлi помiрного збільшення (на 28 %) актiв грумінгу. З віком істотно збільшувалися ЛП виходу з центру “поля” та вегетативна активнiсть (дефекацiї, уринацiї) (в основному за рахунок збiльшення чисельностi “емоцiйних” особин). У 24 мiс. тварин порiвняно з 3 мiс. встановлювалася жорстка зворотна залежнiсть мiж рухливістю i часом виходу з центру “поля” та тiснi кореляцiйнi зв'язки мiж рівнем активності i грумiнгом, мiж низьким рівнем локомоцiї i частотою вiдвiдувань центру “поля”. Значення напруги струму стимуляцiї необхідної для виклику реакцiй на електрошкiрне подразнення в тестованих у ВП старих щурiв були нижчими, нiж у молодих.

Таким чином, результати досліджень свідчили про зниження з віком рiвня локомоцiї, орiєнтувально-дослiдницької поведінки та підвищення рівня “емоцiйностi” (страху, тривоги).

Обмеження активності, збільшення часу виходу з центру “поля” та зрушення вегетативного балансу старих тварин у бік посилення екскреторної функції за стресуючих умов тесту ВП могли бути наслідком вікових змін у емоцiйно-мотивацiйнiй сферi щурiв.

ЗНИЖЕННЯ КОСТИМУЛЯТОРНОЇ ФУНКЦІЇ КЛІТИН ЛОКАЛЬНОГО

МІКРООТОЧЕННЯ Т-ЛІМФОЦИТІВ МОЛОДОЇ СЕЛЕЗІНКИ

ПРИ ГЕТЕРОХРОННОМУ ПАРАБІОЗІ

Шитіков Д.В., Шкумат М.С., Бальва О.В., Уманська К.С., Янкова Т.М., Пішель І.М., Бутенко Г.М.

ДУ «Інститут геронтології імені Д.Ф. Чеботарьова НАМН України», Україна, м. Київ, shytikov.dmitrij@gmail.com Погіршення функціонального стану Т-лімфоцитів з віком є встановленим фактом. Існує дефіцит досліджень присвячених виявленню механізмів старіння регуляторів роботи Тлімфоцитів, зокрема антиген-презентуючих клітин (клітини макрофагального ряду та дендритні клітини) мікрооточення лімфоїдних органів.

Мета дослідження виявити зміни у функціонуванні клітин локального мікрооточення селезінки, що може бути пов’язаним з індукцією вікових порушень активації Т-лімфоцитів.

Матеріал та методи. Парабіотичні пари мишей лінії СВА/Са віком 2 та 24 міс. зі строком співіснування 6 тижнів було створено хірургічним шляхом. Дослідження стану імунної системи проводили з використанням рутинних імунологічних та молекулярних методів. Т-клітини виділяли на колонках з нейлоновою ватою. Виділення стромальних клітин селезінки відбувалося стерильно за допомогою адгезії на пластик, що у подальшому культивувалися сумісно з Т-лімфоцитами у співвідношенні 1:10. Виділення дендритних клітин селезінки проводили стерильно з використанням набору реагентів для імуномагнітного виділення CD11c+-клітин (Stemcell Tech.), що у подальшому культивувалися сумісно з Т-лімфоцитами у співвідношенні 1:100. Культивація проводилася у середовищі RPMI-1640, що містило Кон А (2 мкг/мл) або РНА (10 мкг/мл). Імуноблотинг проводили з використанням антитіл до специфічних антигенів миші.

Результати. Адгезуючі клітини селезінки не викликають істотних змін у проліферації Тлімфоцитів від молодих тварин у відповідь на РНА in vitro. У той же час CD11c+-клітини селезінки старих ізохронних, а також гетерохронних тварин мають значно нижчий стимуляторний вплив на проліферативну активність Т-лімфоцитів у відповідь на Кон А in vitro. Було виявлено зміни у молекулярних каскадах активації та проліферації Т-лімфоцитів.

Висновки. Отримані дані свідчать про провідну роль дендритних клітин периферичних лімфоїдних органів в індукції вікових змін функціонального стану Т-лімфоцитів.

ЗАГОЄННЯ РАН ПРИ СТАРІННІ ШКІРИ У МИШЕЙ ЛІНІЇ FVB ТРАНСГЕННИХ

ПО IGF-1 Шкумат М.С., Клименко П.П., Леонов Ю.І., Шитіков Д.В., Бальва О.В., Пішель І.М., Бутенко Г.М.

ДУ «Інститут геронтології імені Д.Ф. Чеботарьова НАМН України», м. Київ, Україна marina_yuzik@mail.ru Порушення протікання ранової регенерації шкіри при старінні може бути пов'язане зі змінами в морфології і функції шкіри.

Старіння шкіри характеризується зменшенням відповіді на процес запалення, зниженням продукування цитокінів та їх рецепторів і факторів росту. Одним з ростових факторів, який впливає на процеси репарації в організмі є інсуліноподібний фактор росту 1 (IGF-1). Під час загоєння рани IGF-1 впливає на міграцію в ранову область нейтрофілів, моноцитів і фібробластів, стимулює проліферацію клітин і синтез колагену, підвищує швидкість ангіогенезу та відіграє значну роль у морфогенезі волосяних фолікул.

Мета роботи – вивчити вплив трансгенного IGF-1 на стан шкіри і загоєння ран у старих мишей.

Матеріал та методи. Для експерименту були використані молоді (5 міс.) та старі (26 міс.) миші лінії FVB і FVB K14sIGF1+/-. У трансгенних мишей ген IGF-1 щурів був вживлений під промотор гену кератину 14. Забір тканин ран під анестезією проводили на 5-й та 8-й день після нанесення для проведення морфометрії; на 1, 3, 5 та 8-й день для визначення рівня експресії генів IGF-1 та цитокінів методом ПЛР.

Результати дослідження свідчать, що посилення локальної продукції IGF-1 у шкірі старих тварин призводить до посилення проліферації епітеліальних клітин епідермісу, що виражається у рості в товщину. Гіперекспресія IGF-1 у шкірі призводить до підвищення щільності розташування волосяних фолікул у ділянках епідермісу, що прилягають до рани як у молодих, так і у старих трансгенних тварин порівняно з мишами дикої лінії. Завдяки своїй проліферативній активності IGF-1 посилює запальні процеси в рані, тобто іде інтенсивна надлишкова міграція нейтрофілів, макрофагів, що у свою чергу призводить до затримання фази епітелізації у трансгенних тварин.

GENES AND ENVIRONMENT IN EMERGENCE AND DEVELOPMENT OF AGING

Khalyavkin A.V. 1,2, Krutko V.N. 2 Institute of Biochemical Physics of RAS, Moscow, Russia Institute for Systems Analysis, Moscow, Russia E-mail: ab3711@mail.sitek.net In accordance with classic genetic theories of senescence aging events are connected with either mutation accumulation or antagonistic pleiotropy. On the other hand the modern conceptions of genetic mechanisms controlling longevity and rate of aging claim that senescence is consequence of age-dependent changes in expression of set of genes, products of which are involved in a big and cross-talking net of specific signal transduction pathways. We know now that gene activity is dependent on the microenvironment in which it is expressed. In turn, the features of this microenvironment are highly connecting with macro-environment via sensor systems of an organism. Potentially agelessness of the somatic stem cells and an evaluation of theoretically attainable minimal rate of aging realizable in environmental conditions, which induce organisms to function optimally, as well as an analysis of the all findings taken as a whole, shows that they are compatible with the hypothesis that adequate living conditions are conducive to a significant deceleration of the human aging process. Moreover the newest findings indicate that in adequate internal milieu even senescent mitochondria, lens, stem cells, mature neurons etc. can fully restore lost status quo. The interplay of genetic makeup and environmental influences is known to be complex, with important consequences for the development and maintenance of living beings' phenotypes. Therefore fundamental to evolutionary biology is the tendency for organisms to become increasingly adapted to those environments to which they are most commonly exposed. For this reason study of natural aging by means of observation of animals in captivity as well as human beings in highly comfortable conditions will be misleading. Recent findings emphasize the importance of signaling in the regulation of life history traits. This opens an opportunity to modulate organisms’ aging and life span without changing environmental conditions towards more adequate ones in laboratory experiments. In fact, modified products of properly mutated genes involved in regulatory control circuits can mistakenly transform non-adequate external cues of artificial experimental conditions to the regular reaction of an organism on the quite natural environment. The latter may favor the life span extension by means of aging deceleration and an increase in stress resistance. The studies of such genetic modifications are important as they provide a unique view on the mechanisms of life span determination. They may also shed light on possible range of plasticity for both the rate of aging and stress resistance – the two areas of research that are crucial in understanding of the nature of longevity and mechanisms of its modulation by external and internal factors.

INFLUENCE OF AGING RATE ON PROFESSIONAL ADAPTATION

OF WORKERS WITH MENTAL ACTIVITY

Kharkovlyuk-Balakina N.

Institute of Gerontology of the Academy of Medical Sciences of Ukraine, Kiev, Ukraine kbalakine@hotbox.ru To date, actual work in labor physiology is a study of aging rate influence on working ability of person. However, the lack of integrated assessment criteria forces advanced study of psychophysiological indicators of professional adaptation in people of all ages in order to prevent professional fatigue.

Methods. Participants were 120 persons engaged in various kinds of mental work aged 21 to 60 years: namely, teachers, scientific researchers, operators, neurosurgeons. Mental performances were studied with computer-based system of psychophysiological diagnostics of operator activity.

Aging rate was calculated by method developed in the Institute of Gerontology of the Academy of Medical Sciences of Ukraine.

Conclusions. Аnalysis of psychophysiological indicators of mental activity allows defining age specificity in the periods of the first mature age (I) – 21-35 years and the second mature age (II)

-36 – 55 years (for women) and 36-60 years (for men). In the period (I) high mental activity is provided by high functional status of visual information processing with low indexes of latent periods of simple reaction time (SRT) and high short-term memory performance. In the period (II) mental activity is maintained at a high level of reliability due to the attention and perception functions which provide work stability.

The analysis of indexes of functional age of the inspected persons allows to establish influence of aging rate on professional adaptation to the terms of labour activity. In the period (I) normal aging rate was revealed in 94 % of scientific researchers and teachers 87 %, while neurosurgeons and operators showed 82 % and 80 % respectively. However, in the period (II) the percentage of rapidly aging subjects tend to increase up to 25 % in doctors, neurosurgeons and operators. Despite age involution of certain physiological systems, mental activity of professionals after age of 35 is still characterized by stable psychophysiological indicators of professional activity (perception, attention, short memory), which primarily confirms regulatory-adaptation aging theory of V.V. Frolkis.

WHAT WE USUALLY STUDY WHEN WE THINK WE STUDY AGING

Khokhlov A.N.



Pages:     | 1 || 3 |

Похожие работы:

«муниципальный район Кошкинский Раздел "Охрана окружающей среды и природопользования" на 2014 год и плановый период 2016 – 2018 годов За последние пять лет состояние окружающей среды на территории муниципального района Кошкинский удовлетворительное. Экологическая ситуация остатся стабильно...»

«РЕЗУЛЬТАТЫ ОСВОЕНИЯ КУРСА "Изучаем историю родного края" ОСНОВНЫЕ ЗАДАЧИ ( ЦЕЛИ) ИЗУЧЕНИЯ КУРСА ВНЕУРОЧНОЙ ДЕЯТЕЛЬНОСТИ "Изучаем историю родного края" В 7 КЛАССЕ Цели курса: создание условий для социализации личности; формирование научных представлений,...»

«Министерство образования Республики Беларусь Учреждение образования "Гомельский государственный университет имени Франциска Скорины" ГИДРОЭКОЛОГИЧЕСКОЕ СОСТОЯНИЕ РЕК БАССЕЙНА ДНЕПРА (В ПРЕДЕЛАХ ГОМЕЛЬСКОЙ ОБЛАСТИ) Гомель 2008 УДК 574.5 (476.2, 282.2 Днепр) Б...»

«1. ПЛАНИРУЕМЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ ОСВОЕНИЯ УЧЕБНОГО ПРЕДМЕТА Предметные компетенции формируются в рамках определённого предмета. В процессе преподавания химии формируется представление о химии как неотъемлемой составляющей естествен...»

«Муниципальное бюджетное общеобразовательное учреждение "Средняя общеобразовательная школа № 6" Принято Утверждено на педагогическом совете приказом МБОУ "СОШ№6" протокол от 29.05.2017г. № 5 29.05.2017г №...»

«ОГРАНИЧЕНИЯ ЖИЗНЕДЕЯТЕЛЬНОСТИ И РЕАБИЛИТАЦИЯ ПРИ НАРУШЕНИЯХ РИТМА СЕРДЦА Санкт Петербург СпецЛит УДК 616 036.8 О 39 Авторы составители: Заболотных Инга Ивановна — доктор медицинских наук; Кантемирова Раиса Кантемировна — кандидат медицинских наук; Ишутина Инна Сергеев на; Старобина Елена Михайловна — доктор п...»

«Самарская Лука: проблемы региональной и глобальной экологии. Самарская Лука. 2009. – Т. 18, № 1. – С. 78-85. УДК 591.5:598.113.6 ЭКОЛОГИЯ ЖИВОРОДЯЩЕЙ ЯЩЕРИЦЫ, LACERTA VIVIPARA, ГОСУДАРСТВЕННОГО ЗАПОВЕДНИКА "КОМСОМОЛЬСКИЙ" © 2009 О.Г. Лазарева Ивановский государственный университет, г. Иваново (Россия) herpet.log@mail.ru Поступила 18 января 2008 г. Обсужд...»

«1 Зелная палочка. №2 Февраль 2013 МБОУ—гимназия №3 г. Тулы МБОУ— 2013 год объявлен Президентом Российской Федерации Годом охраны окружающей среды. Однако вопросами охраны окружающей среды нужно заниматься не только в специальный год, а ежедневно и ежечасно. Это большая задач...»

«2011 БЕЛКИ ПЕПТИДЫ РОССИЙСКАЯ АКАДЕМИЯ НАУК Научный совет по биоорганической химии Учреждения Российской академии наук: Институт биологии Карельского научного центра РАН Институт биоорганической химии им. академиков М.М. Шемякина и...»

«Николай Владимирович Тимофеев-Ресовский ИЗБРАННЫЕ ТРУДЫ ИЗ ИСТОРИИ МЕДИЦИНСКОЙ мысли Н. В. Тимофеев-Ресовский Избранные трудь1 Генетика. Эволюция. Биосфера Москва ссМедицина)) 1996 ББК 53.6 28.04 Т41 УДК 612.052.014.482+577.2 Портрет Н.В. Тим...»

«МИНИСТЕРСТВО ОБРАЗОВАНИЯ И НАУКИ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "ТЮМЕНСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ" Институт биологии Кафедра зоологии и эволюцио...»

«Приказ Минздрава России от 15.11.2012 N 927н Об утверждении Порядка оказания медицинской помощи пострадавшим с сочетанными, множественными и изолированными травмами, сопровождающимися шоком (Зарегистрировано в Минюсте России 21.01.2013 N 26634) Документ предоставлен Ошибка! Недопустимый объект гиперссылки....»

«Министерство образования и науки Российской Федерации Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Пермский государственный национальный исслед...»

«Экологическое общество "Зеленое спасение" Республика Казахстан, Алматы, 2008 К Третьему совещанию сторон Орхусской конвенции For the Third Meeting of the Parties to the Aarhus Convention The Ecological Society Green Salvation The Republic of Kazakhs...»

«МЕЖДУНАРОДНАЯ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКАЯ КОНФЕРЕНЦИЯ "УРАЛЬСКАЯ ГОРНАЯ ШКОЛА – РЕГИОНАМ" 8-9 апреля 2013 года ГЕОЛОГИЯ, ГЕОФИЗИКА И ГЕ ОЭКОЛОГИЯ УДК 553. 411 ' 44 (598) СТРУКТУРНЫЕ УСЛОВИЯ ФОРМИРОВАНИЯ ОЛОВОРУДНОГО РАЙОНА НАМПАТЕН (НДР ЛАОС) Суваннудом Б.1, Слободчиков Е. А.2 Народно-демократич...»

«Принципы экологии 2017. Т. 6. № 1 научный электронный журнал ПРИНЦИПЫ ЭКОЛОГИИ http://ecopri.ru http://petrsu.ru Издатель ФГБОУ ВО "Петрозаводский государственный университет" Российская Федерация, г. Петрозаводск, пр. Ленина, 33 Научный электронный журнал ПРИН...»

«УДК 612.017.1:616-097 КОЛИКОВА ЮЛИЯ ОЛЕГОВНА АУТОАНТИТЕЛА К ДНК В СЫВОРОТКЕ КРОВИ ЗДОРОВЫХ ЛИЦ 03.00.04 биохимия АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Казань 2003 Работа выполнена на кафедре биохимии Казанского государственного универс...»

«МЭФ "КАСПИЙСКИЙ ДИАЛОГ, 2017". ПОСТРЕЛИЗ. 14 апреля 2017 года в Москве в МГИМО МИД России состоялся Юбилейный Десятый Международный Экономический Форум "Каспийский диалог". Форум "Каспийский диалог" проводится в Москве с 2008 года (до 2011 года...»

«1 Уважаемый Сергей Ефимович, Уважаемые коллеги. Особое внимание Службой уделяется работе по обеспечению природоохранного законодательства в районе строительства олимпийских объектов г. Сочи. Результаты нашей текущей деятельности взаимоувязаны с основными экологическими обязательствами в рамках заявочной книги "...»

«Экологическое занятие Подготовила и провела воспитатель высшей категории Васильева С.А "Лесное царство" Цель: закрепить знания о лесе, как о экосистеме.Задачи: — дать детям представление о том, что лес – это живой организм, который мы должны беречь, уч...»

«Экосистемы. 2016. Вып. 6. С. 100–106 СЕЛЕКЦИЯ И ДЕКОРАТИВНОЕ РАСТЕНИЕВОДСТВО УДК: 582.973:631.526.32 ХОЗЯЙСТВЕННО-БИОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ДЕКОРАТИВНЫХ СОРТОВ И ФОРМ ЖИМОЛОСТИ (LONICERA L.) В РОССИИ Сорокопудов В. Н.1, Куклина А. Г.2 Всероссийский селекционно-технологический институт садо...»

«RU 2 378 624 C2 (19) (11) (13) РОССИЙСКАЯ ФЕДЕРАЦИЯ (51) МПК G01F 23/296 (2006.01) ФЕДЕРАЛЬНАЯ СЛУЖБА ПО ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ, ПАТЕНТАМ И ТОВАРНЫМ ЗНАКАМ (12) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ПАТЕНТУ (21), (22) За...»

«Известия высших учебных заведений. Поволжский регион УДК 618.3-06:616.98:579.861.2 Н. Н. Митрофанова, В. Л. Мельников, А. М. Слетов РЕЗУЛЬТАТЫ МОНИТОРИНГА ВИДОВОГО СОСТАВА И ОСНОВНЫХ БИОЛОГИЧЕСКИХ ХАРАКТЕРИСТИК МИКРОЦЕНОЗО...»























 
2017 www.kn.lib-i.ru - «Бесплатная электронная библиотека - различные ресурсы»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.