WWW.KN.LIB-I.RU
БЕСПЛАТНАЯ  ИНТЕРНЕТ  БИБЛИОТЕКА - Различные ресурсы
 


«ПАРАЗИТОЛОГИЯ, XIV, 3, 1980 УДК 576.895.122 : 591.16 ПРОЦЕСС ВЫЛУПЛЕНИЯ МИРАЦИДИЕВ PHILOPHTHALMUS RHIONICA (TREMATODA) И. А. Тихомиров, О. ...»

ПАРАЗИТОЛОГИЯ, XIV, 3, 1980

УДК 576.895.122 : 591.16

ПРОЦЕСС ВЫЛУПЛЕНИЯ МИРАЦИДИЕВ

PHILOPHTHALMUS RHIONICA (TREMATODA)

И. А. Тихомиров, О. Ю. Семенов

Ленинградский государственный университет

Описываются процессы, связанные с попаданием мирацидиев Philophthalmus

rhionica во внешнюю среду. Показано, что основным фактором, блокирующим выход

мирацидиев из яиц, вероятно, является высокое осмотическое давление, создаваемое в матке червя за счет веществ, секретируемых клетками маточного эпителия. При изучении 12 видов марит, относящихся к разным семействам, эти железистые образования были обнаружены только у так называемых «живородящих» трематод.

При изучении мирацидиев большое внимание уделяется факторам, влияющим на выход личинок из яиц. Однако собственно процесс вылупления исследовался главным образом лишь у Fasciola hepatica и различных видов рода Schistosoma. Известно, что важное значение на этот процесс оказывают абиотические факторы среды, такие, как свет, температура, рН и соленость (Lengy, 1960; Rowcliff, Ollerenshaw, 1960; StyczinscaJurewicz, 1965, и др.). Практически ничего не известно о вылуплении мирацидиев так называемых «живородящих» трематод, поскольку в литературе имеются очень скудные и не всегда точные сведения об этом процессе (Rees, 1940; Гинецинская, 1954; West, 1961, и др.).

Целью настоящей работы явились изучение факторов, влияющих на выход мирацидиев Philophthalmus rhionica, а также сравнение гистологического строения маток марит разных видов трематод в зависимости от того, где и когда осуществляется вылупление личинок.

МАТЕРИАЛ И МЕТОДИКА

Способ культивирования марит и методика получения мирацидиев Ph. rhionica в лабораторных условиях описаны нами ранее (Семенов, 1976; Тихомиров, 1976). Изучение гистологического строения матки было проведено на 12 видах сосальщиков, относящихся к различным систематическим группам: F. hepatica, Ph. rhionica, Diplodiscus subclavatus, Gorgodera pagenstecheri, Opisthioglyphe rastellus, Encyclometra colubrimurorum, Pneumonoeces asper, P. variegatus, Skrjabinoeces similis, Pleurogenes claviger, Haplometra cylindracea, Macrodera longicollis. Большинство видов были собраны в природе от спонтанно зараженных животных-хозяев. Марит фиксировали жидкостью Буэна, жидкостью Ценкера и 10%-ным нейтральным формалином, заливали обычным способом в парафин, после чего изготовляли серии срезов толщиной в 5—7 мкм.

Для выявления и гистологического анализа железистых клеток использовали следующие методы окраски препаратов: железный гематоксилин и азокармин — по Гайденгайну, паральдегид-фуксин — по Гомори в модификации Габе, паральдегид-тионин — по Паже, альциановый синий и бромфеноловый синий — сулеймовый метод (Пирс, 1962).

Микрофотографические работы осуществляли при помощи микроскопа МБИ-3 с апохроматической оптикой и использованием микрофотонасадки МФН-11. Съемку производили на узкие роликовые фотопленки «Микрат-300» (4 ед. чувствительности ГОСТ) и «Аэрофотопленку» (1000— 1400 ед. ГОСТ).

Измерение температуры производили электротермометром (Манзюк, 1968). В качестве датчика использовали термосопротивление МТ-54 «М»

(датчик Карманова), линейные размеры которого 0. 6 x 1. 0 мм.

ПОЛУЧЕННЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Местом паразитирования половозрелого поколения Ph, rhionica служит инфраорбитальная полость птиц и млекопитающих. Обычно сосальщики располагаются под веком. При омывании червей средой Прескота они начинают откладывать яйца, которые сначала поступают в полость под веком, а затем вымываются в окружающую среду. Если стеклянной пипеткой отсосать слезу из под века зараженного животного, то в ней не окажется ни яиц, ни тем более мирацидиев паразита. Следовательно, до контакта с водой мариты яиц не откладывают.





Находясь в инфраорбитальной полости, черви постоянно смачиваются слезной жидкостью, в состав которой входит 1.8% всевозможных солей, 1.1% из которых различные хлориды (Лапина, 1965). Температура под веком кролика достигает 36.4—38.2°. Активная реакция слезы (рН) колеблется от 7.2—7.4, тем самым мало отличаясь от рН дистиллированной воды и среды Прескота.

По-видимому, при попадании воды под веко наиболее значительные изменения претерпевают существующие там температура и тоничность.

Дальнейшие опыты показали, что при омывании марит 0.5—2.0%-ным растворами NaCl, разведенными на среде Прескота или в бидисциллированной воде, находящиеся в матке яйца не выбрасываются. Это наблюдается при работе с растворами любой температуры (15, 20, 25, 30°). Однако чистая без соли среда Прескота независимо от ее температуры вызывает массовую откладку яиц.

Основываясь на этих наблюдениях, можно прийти к выводу, что основным фактором, блокирующим выведение яиц из полости матки паразита в окружающую среду, является высокое осмотическое давление слезной жидкости. Его понижение, по-видимому, ведет к расслаблению сфинктера, закрывающего выводное отверстие матки.

В дистальных отделах матки скапливаются яйца, содержащие полностью развитых, готовых к выходу мирацидиев. Личинка прикреплена к яйцевой оболочке при помощи системы тяжей (Тихомиров, 1976). После попадания яиц в воду уже через полминуты из них вылупляются мирацидии. Собственно процесс выхода идет довольно быстро и занимает от 30 с до 1—2 мин.

–  –  –

Яйцо, оказавшееся в воде, начинает набухать, причем увеличиваются в размерах как яйцевая оболочка, так и заключенный в ней мирацидий (см. таблицу; рис. 1). Параллельно с этим наблюдается активизация личинки. Появляется биение ресничек, тело животного интенсивно сокращается. В какой-то момент начинают рваться поддерживающие личинку тяжи. После того как разрушается последний из них, соединяющий хо

–  –  –

боток мирацидия со скорлупой, яйцевая оболочка лопается в этом месте.

Мирацидий выходит через образовавшуюся неправильной формы щель (Тихомиров, 1976). В первый же момент наблюдается значительное увеличение объема тела личинки. Лишь после достижения ею определенных, характерных для данного вида размеров, она переходит к активному плаванию. Эластичная яйцевая оболочка после освобождения от личинки уменьшается в размерах (см. таблицу). Вылупление мирацидиев протекает как на свету, так и в темноте.

По нашим наблюдениям, мирацидии Ph. rhionica никогда не выходят из яиц, содержащихся в матке мариты, в случае, если червь находится на коньюктиве зараженного животного. Вылупление мирацидиев не про

–  –  –

Рис. 2. Поперечные срезы через дистальный отдел матки некоторых видов трематод.

А — Haplometra cylindracea, В — Philophthalmus rhionica, В — Encyclometra columbrimurorum.

исходит и при помещении червей в 0.8—2.0%-ные растворы NaCl. Правда, если в этом случае при помощи препаровальной иглы разорвать покровы паразита и таким образом добыть яйца, то зрелые мирацидии, находящиеся в них, начинают вылупляться. Причем выход личинок происходит даже в микроаквариумах с 2.0%-ным раствором NaCl. Однако в таком растворе вследствие повышенного содержания соли личинки довольно быстро погибают. С другой стороны, если червей поместить в микроаквариум с чистой водой, то через 10—15 мин можно наблюдать мирацидиев, вышедших из яиц и плавающих непосредственно в полости матки паразита.

Эти наблюдения позволили предположить, что в естественных условиях мирацидии Ph. rhionica не вылупляются до тех пор, пока яйца не выйдут из организма мариты. Кроме этого, тоничность среды, блокирующая откладку яиц, не является фактором, сдерживающим вылупление мирацидиев.

Можно думать, что в полости матки мариты существуют какие-то специфические условия, препятствующие вскрытию яиц с заключенными в них мирацидиями. С этой целью было предпринято изучение гистологического строения матки ряда видов трематод. Изучение гистологических препаратов показало, что в строении матки у марит, относящихся к разным группам, упоминавшимся выше, имеются существенные различия. У видов, развитие мирацидиев которых протекает в окружающей среде, а также у тех видов, у которых мирацидии не выходят из яиц вплоть до их попадания в организм промежуточного хозяина, стенки матки на всем протяжении от тельца Мелиса до метратерма образованы уплощенными клетками с овальными пузырьковидными ядрами. Никаких секреторных клеток в маточном эпителии обнаружить не удалось (рис. 2, А).

В противоположность этому у так называемых «живородящих» трематод, мирацидии которых вылупляются сразу же после попадания яиц в воду, стенки матки содержат многочисленные секреторные элементы.

У Ph. rhionica в дистальном отделе матки отчетливо выделяется участок, стенки которого по своему гистологическому строению резко отличны от остальных отделов маточной трубки. Снаружи он окружен толстым слоем кольцевых мускульных волокон. Внутренняя поверхность выстлана клетками железистого эпителия (рис. 2, Б). Сами клетки обладают цилиндрической формой и содержат крупные секреторные включения.

Последние обычно располагаются в опикальных концах клеток. На ряде препаратов отчетливо видно, что эти секретосодержащие участки отшнуровываются и поступают в просвет матки. Судя по характеру получаемой при использовании методик окраски, перечисленных выше, секрет по своей химической природе представляют кислые мукополисахариды.

Несколько иная картина была обнаружена у другого «живородящего»

вида — Encyclometra colubrimurorum (Гинецинская, 1968). Маточный эпителий последнего содержит многочисленные железистые клетки, которые, однако, не собраны в один компактный участок, а диффузно распределены по всей длине матки. Железистые клетки расположены поодиночке непосредственно в толще стенки матки и губоко вдаются в ее просвет (рис. 2, В). От остальных эпителиальных клеток они отличаются значительно большими размерами. Их цитоплазма целиком заполнена секретом, имеющим, по-видимому, мукополисахаридную природу.

Наличие секреторных элементов в стенке матки у Ph. rhionica и Е. coluhrimurorum и отсутствие у других исследованных видов позволяет думать, что именно с этими образованиями связаны механизмы, блокирующие выход личинок из яиц, находящихся в полости матки. Кроме того, такой секрет может выполнять и защитную функцию, предохраняя нежные яйца от повреждения в матке. Большое количество секрета поступает во внешнюю среду с яйцами. Последние как бы впаяны в слизистый тяж, выходящий из маточного отверстия. Вскоре после выхода слизь растворяется и освобождает яйца.

Для проверки этого предположения было исследовано действие гепарина на яйца Ph. rhionica. Если только что отложенные яйца перенести в раствор гепарина (38.5 мг/мл), то выхода личинок из них не наблюдается. Постепенно разбавляя раствор, можно достичь такой его концентрации, при которой мирацидии начинают вылупляться. Оказалось, что и в растворах других веществ с высокой тоничностью блокируется процесс выхода мирацидиев. Это происходит в 0.6—1.0 М растворах сахарозы, 0.4—0.6 М растворах цитрата натрия или NaCl. Причем из яиц, пролежавших в течение нескольких часов в растворах указанных веществ, можно получить нормальных мирацидиев. Для этого необходимо лишь перенести яйца в чистую воду.

В связи с изложенным выше уместно сказать несколько слов о так называемом явлении «живорождения» у трематод. Судя по нашим наблюдениям, в естественных условиях у вида Ph. rhionica вылупление мирацидиев в полости матки не происходит. Данные о том, что этот процесс имеет место у других видов (Rees, 1940; Гинецинская, 1954, 1968; Быховская-Павловская, 1962), скорее всего являются результатом некорректных наблюдений. По-видимому, отмеченный этими авторами выход мирацидиев из яиц непосредственно в матке паразита происходил из-за продолжительного нахождения червей в воде, что и повлекло за собой изменение водно-солевого равновесия внутри матки.

По мнению Гинецинской (1968), возникновение «живорождения»

возможно лишь у тех трематод, которые паразитируют в позвоночных, экологически связанных с водной средой. Вторым важным условием является локализация трематод в таких органах хозяина, из которых живые личинки могут попасть в воду очень быстро и минуя пищеварительный тракт, пребывание в котором могло бы повредить личинкам.

Нельзя согласиться со второй частью этого утверждения, поскольку некоторые «живородящие» мариты, например Е. colubrimurorum, локализуются в желудке хозяина (ужа).

По-видимому, «живорождение» надо рассматривать как одну из ветвей более общего направления адаптивных эволюционных преобразований в пределах класса трематод. Речь идет о смещении сроков эмбрионального развития мирацидиев на фазу мариты (Гинецинская, 1968).

Наиболее примитивным, по-видимому, надо считать случай, когда развитие мирацидиев целиком протекает в окружающей среде (.Fasciolidae. Echinostomatidae, Prostogonimidae, Strigeidae, Dip lost omatidae, Paramphistomatidae и др.)- При этом, естественно, под действием различных неблагоприятных условий среды (высыхание, замерзание, ультрафиолетовое излучение и т. д.) множество личинок погибает, так и не закончив своего эмбриогенеза. В дальнейшем эволюция шла по пути уменьшения длительности эмбриогенеза в окружающей среде (некоторые Plagiorchiidae) вплоть до его полного завершения в материнском организме (CycloPlagiorchidae, Dicrocoelidae, Notocotilidae и coelidae, Philophthalmidae, др.) или организме дефенитивного хозяина (Schistosomatidae, Sanguinis colidae).

У представителей семейств Plagiorchidae, Dicrocoelidae, N otocotilidae мирацидии не выходят из яиц вплоть до попадания их в организм промежуточного хозяина и способны очень продолжительное время сохранять инвазионную способность. Наоборот, у трематод из семейств Суclocoelidae, Philophthalmidae и Zoogonidae вылупление личинок происходит почти сразу же после попадания яиц в воду и несомненно этот процесс ни в коем случае нельзя считать истинным живорождением. «Живорождение» повлекло за собой и некоторые морфологические изменения как мариты, так и яиц. Для половозрелого поколения это выразилось в возникновении специальных железистых образований в области дистального отдела матки. Секрет этих железистых клеток служит для создания определенного осмотического давления, благодаря которому блокируется вылупление мирацидиев. Личинки в таких условиях как бы законсервированы внутри яиц и абсолютно не активны. Яйца «живородящих» трематод характеризуются мягкой оболочкой, что, по-видимому, связано с отсутствием у нее защитной функции, поскольку эмбриогенез полностью проходит в организме мариты.

ВЫВОДЫ

1. В естественных условиях созревшие яйца Ph. rhionica накапливаются в матке червя, выброса их в слезную жидкость не происходит. Яйца выводятся из матки только при контакте мариты с водой.

2. Основным фактором, блокирующим выведение яиц из полости матки паразита в окружающую среду, является высокое осмотическое давление слезной жидкости, понижение которого, по-видимому, ведет к расслаблению сфинктера, закрывающего выводное отверстие матки.

3. Мирацидии не вылупляются из яиц до тех пор, пока они не выйдут из организма мариты и не попадут в воду.

4. Сдерживание вылупления личинок происходит благодаря гипертоничности среды в полости матки паразита, которая достигается за счет веществ (скорее всего кислых мукополисахаридов), секретируемых клетками маточного эпителия. Эти железистые образования, по-видимому, свойственны только так называемым «живородящим» трематодам.

Литература

Быховская-Павловская И. Е. 1962. Трематоды птиц фауны СССР.

Изд-во А Н СССР, М.—Л. : 1—407.

Г и н е ц и н с к а я Т. А. 1954. Жизненный цикл и биология стадий развития Cyclocoelum microstomum (Trematoda). — Уч. зап. Ленингр. ун-та, 172, сер. биол., 35 : 90—113.

Г и н е ц и н с к а я Т. А. 1968. Трематоды, их жизненные циклы, биология и эволюция. «Наука», Л. : 1—410.

Л а п и н а И. А. 1965. Физиология слезной железы. «Медицина», Л. : 1—164.

М а н з ю к А. 1968. Медицинский транзисторный термометр. — Радио : 1—51.

П и р с Э. 1962. Гистохимия. Изд-во ИЛ, М. : 1—962.

Семенов О. Ю. 1976. Экспериментальное изучение биологии мирацидия Philophthalmus rhionica Tichomirov, 1976 (Trematoda, Philophthalmidae. — Паразитология, 10, (5) : 439—443.

Тихомиров И. A. 1976. Жизненный цикл сосальщика Philophthalmus rhionica п. sp. — Вестн. Ленингр. ун-та, 15 : 33—47.

L e n g y J. 1960. Study on Paramphistomum microbothrium, a rumen parasite of cattle in Israel. — Bull. Res. Consil. Israel, 9 (2—3) : 71—130.

R e e s F. G. 1940. Studies on the germ cells cycle of the digenetic trematode Parorchis acanthus Nicoll. 2. Structure of the miracidium and germinal development in the larval stages. — Parasitology, 32 : 372—391.

R o w c l i f f S. A., O l l e r e n s h a w C. B. 1960. Observations on the bionomics of the egg of Fasciola hepatica. — Ann. Trop. Med. Parasitol., 54 (2) : 172—181.

S t y c z i n s c a - J u r e w i c z E. 1965. The influens of a brackish environment on the development of eggs and viability of miracidia of Fasciola hepatica. — Acta parasitol. polon., 13 : 483—497.

W e s t A. F. 1961. Studies on the biology of Philophthalmus gralli Mathis and Leger, 1910 (Trematoda : Digenea). — Amer. Midi. Nat., 66 (2) : 363^-383.

THE H A T C H I N G PROCESS OF M I R A C I D I A

OF PHILOPHTHALMUS RHIONICA (TREMATODA)

I. A. Tikhomirov, 0. Ju. Semenov SUMMARY The hatching process of miracidia of Ph. rhionica is described. Mature eggs are contained in the uterus of the fluke. Hatching of the eggs and liberation of the miracidia take place in the water immediately after the eggs have left the flukes. After hatching the size of larvae increases and they begin to swim actively.

The main reason blocking the hatching is the high osmotic pressure in the uterus of the fluke which is created by some substances secreted in the secretory cells. The same cells are found only in the uterus of «viviparous» trematodes.




Похожие работы:

«ВУЛКАНОЛОГИЯ И СЕЙСМОЛОГИЯ 1981 №1 ЛЕОНОВ В. Л. РАЗРЫВНЫЕ НАРУШЕНИЯ ПАУЖЕТСКОЙ ВУЛКАНО-ТЕКТОНИЧЕСКОЙ СТРУКТУРЫ Паужетская вулкано-тектоническая структура на Южной Камчатке выделена и описана в последнее время (Шеймо...»

«Научный журнал "Известия КГТУ", №36, 2015 г. УДК 551.461.2 (261.24) МЕЖГОДОВАЯ ИЗМЕНЧИВОСТЬ ГИДРОМЕТЕОРОЛОГИЧЕСКИХ ПОЛЕЙ И ПРОМЫСЕЛ ПЕЛАГИЧЕСКИХ РЫБ В БАЛТИЙСКОМ МОРЕ В. Ф. Дубравин LONGTIME VARIABILITY OF HYDROMET...»

«Посудомоечная машина Руководство пользователя Модель DDW-M1211/DDW-M1211S Вместимость: 12 комплектов 1) Информация по технике безопасности Прочитайте данное 2) Краткое руководство по эксплуатации руководст...»

«УДК 821.111-31 ББК 84(4Вел)-44 Х21 Joanne Harris CHOCOLAT Copyright © 1999 Joanne Harris Оформление серии Н. Ярусовой Харрис, Джоанн. Х21 Шоколад / Джоанн Харрис ; [пер. с англ. И. Новоселецкой]. — Москва : Издательство "Э", 2016. — 352 с. — (Всемирная литература). ISBN 978-5-699-93135-4 Сонное спокойствие мале...»

«Тематический план работы на летний оздоровительный период 01.06.2017 – 31.08.2017 в группе "Капелька" Подготовила: Зуйкина Т.В. воспитатель мл. гр.Задачи летней оздоровительной работы: -Создать условия, обеспечивающие охрану жизни и укрепление здоровья детей, предупреждение заболеваемости и травматизма; способствующие их физическому и умст...»

«ИУДАИЗМ (УКРАИНСКИЙ СКЛАД) Показано 1 253 (всего 253 позиций) [04001000] Рамбам. Главы из книги Мишнэ Тора (Rambam) избранные главы из книги, представляющей собой первый систематизированный свод законов, Галахи.Содержание:От и...»

«Оглавление Введение Память огня Часть I. ИМПЕРИЯ СТРАХА И РИТОРИКА ТЕРРОРА Часть II. В религии экстремизма нет Часть III. ЗОНА ОСОБОГО ВНИМАНИЯ Часть IV. КАСПИЙ МЕЖДУ ТЫСЯЧЕЛЕТИЯМИ Часть V. ПУТИ БЕЗОПАСНОСТИ Н. А. НАЗАРБАЕВ КРИТИЧЕСКОЕ ДЕСЯТИЛЕТИЕ Введение Память огня Сквозь плотную завесу пыли и дыма пробива...»

«В ТЕ БЛОКАДНЫЕ ГОДЫ Татьяна Козупеева В ЛЕНИНГРАДЕ Издание второе Печатается по решению Ученого совета ИППЭС КНЦ РАН УДК 94 (470.23-25) Козупеева Татьяна Алексеевна. В те блокадные годы в Ленинграде. Апатиты: Изд-во Кольского научного центра РАН....»

«© ЕУСПб, 2015 Т. 3 №1 82–109 ISSN 2310­3817 Бибих ин, Хайд еггер, русс Паламао  проблеме энер гии Сергей Хоружий Институт философии Российской академии наук Бибихин, Хайдеггер, Палама о проблеме энергии1 Аннотация В статье анализируется трактовка проблемы эн...»








 
2017 www.kn.lib-i.ru - «Бесплатная электронная библиотека - различные ресурсы»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.